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以昆明狼犬为对象,作了梯度离心法去除精清对犬精液冷冻效果的影响;精液稀释液配方的筛选及优化;精液平衡方法研究;冷冻剂型及冷冻方法的研究;冷冻精液解冻方法的研究;冷冻精液人工授精等试验。结果表明:1、梯度离心法去除精清对犬精液冷冻效果的影响。对5只昆明狼犬新鲜精液进行不离心（对照组）、1000r/min、1500r/min、2000r/min、2500r/min、3000r/min、3500r/min、4000r/min离心去除精清处理,并用筛选出的Ⅰ号稀释液代替精清,反复冲洗后行超低温冷冻,解冻后检测精子的活率结果证明:1500r/min离心组活率达43.5±2.43,但与2000r/min组差异不显著（P＞0.05）,二者与其它组差异均较明显（P＜0.05）。1500r/min组精子的顶体完整率优于其它各组（P＜0.05）、精子畸形率最低（24.5±1.87）、生存指数最高（28.2±1.24）、解冻后4℃条件下精子存活时间可达96h,优于其它各组（P＜0.05）。2、精液稀释液配方的筛选及优化。用筛选出的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组稀释液分别制作颗粒冻精,解冻后测得结果表明:Ⅰ组的冻后平均活率优于Ⅱ、Ⅲ组,但Ⅰ、Ⅱ组之间差异不显著（P＞0.05）,均与Ⅲ组差异显著（P＜0.05）;顶体完整率和畸形率,Ⅰ组均优于Ⅱ、Ⅲ组（P＜0.05）。稀释液优化过程中发现Ⅰ组中分别添加一定量的VB12、COVB和VC不但均能够提高冷冻-解冻精子的活率,对顶体有保护作用,而且可降低精子的畸形率,但与对照组差异不显著（P＞0.05）。3.、精液平衡方法研究。精液稀释后用16层纱布、8层纱布包被平衡法和100ml、200ml、300ml体积梯度水浴平衡法进行比较,结果表明:16层纱布包裹放入4℃冰箱内平衡3.5～4.0h后再超低温冷冻,解冻后精子平均活率（43.23%）、生存指数（27.22±2.45）和顶体完整率（77.59%）与200ml水浴组接近（P＞0.05）,与其它组差异显著（P＜0.05）。4、精液冷冻剂型及冷冻方法的研究。试验用炸熏法颗粒、液氮铝饭盒法颗粒、细管炸熏法及安瓶炸熏法四种冷冻剂型对精液冷冻-解冻后比较结果表明:炸熏法制作的颗粒冻精活率为43.48±2.07,明显优于液氮铝饭盒法颗粒、细管和安瓶法（P＜0.05）。用程序冷控法按照程序Ⅰ、程序Ⅱ、程序Ⅲ制作细管冻精,解冻后测得精子活率结果证明:程序Ⅰ（32.08±3.16）优于程序Ⅱ（25.26±0.92）和程序Ⅲ（14.57±2.09）（P＜0.05）。炸熏法颗粒优于程序Ⅰ法（P＜0.05）。5、冷冻精液解冻方法的研究。用干解冻和湿解冻法解冻颗粒冻精的结果表明:50～55℃水浴条件下干解冻法解冻精子的平均活率（42.30%）高于湿解冻法（P＞0.05）;测得精子顶体完整率的结果显示:干解冻法（67.01±2.20）明显优于湿解冻法（p＜0.05）,但前者的精子畸形率显著高于后者（p＜0.05）。6、冷冻精液人工授精。将10只母犬随机分成冷冻精液组（6只）和鲜精组（4只）,用同一公犬精液做供试精液,均适时子宫内输精三次,间隔时间24h,结果表明:冷冻精液受胎率为50.00%,鲜精受胎率为75.00%。