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荔枝霜疫病是国内外荔枝生产中的重要病害,目前防控荔枝霜疫病最为有效的方法是化学防治。其中醚菌酯和吡唑醚菌酯对荔枝霜疫病等病害都有很好的防治效果,且至今未见有关抗药研究性的报道。本研究用菌丝生长速率法测定了100多个分离自全国各地的荔枝霜疫霉(Peronophythora litchii)菌株对醚菌酯和吡唑醚菌酯的有效中浓度值(EC50),建立了荔枝霜疫霉病菌对醚菌酯和吡唑醚菌酯的敏感性基线,评价了田间采集菌株的抗药性程度。同时,通过药剂驯化的方法在室内诱导获得多个中抗醚菌酯和高抗吡唑醚菌酯的抗药性菌株,对这些抗性菌株的生物学特性和分子抗性机制进行了研究,主要结果如下:1、126株荔枝霜疫霉对醚菌酯的EC50值在0.313833.3983μg·mL-1之间,平均值是0.8485±0.0449μg·mL-1。利用箱线图在这些菌株的EC50值中鉴别出了5个异常值。以剔除这5个异常值后的121个菌株的EC50平均值0.7748±0.0301μg·mL-1作为荔枝霜疫霉对醚菌酯的敏感性基线。以该敏感性基线为基准,计算各菌株的抗性指数(RF),结果显示供试的126个菌株抗性指数均小于5.0,根据FAO抗药性评价标准均属敏感菌株。在醚菌酯中加入10μg·mL-1水杨肟酸(SHAM)后,这些菌株的EC50平均值下降为0.6381±0.0307μg·mL-1,表现出明显的协同增效作用。通过药剂驯化从10株敏感菌株中获得6株抗醚菌酯的中等抗性菌株,抗性指数在16.1633.51之间。这6株抗醚菌酯菌株的抗药性大多数不稳定,在无药培养基的EC50值随着转接代数的增长而逐渐下降,除了rm5外其它菌株在继代培养9代后均下降至敏感水平。抗性菌株的菌落和孢子囊形态、菌丝生长速率均与亲本敏感菌株无明显差异,但休止孢子萌发和致病力方面则显著低于亲本敏感菌株。2、122株荔枝霜疫霉对吡唑醚菌酯的EC50值在0.06950.6161μg·mL-1之间,平均值是0.2358±0.0096μg·mL-1。利用箱线图在这些菌株的EC50值中鉴别出了2个异常值。以剔除这2个异常值后的120个菌株的EC50平均值0.2298±0.0087μg·mL-1作为荔枝霜疫霉对吡唑醚菌酯的敏感性基线。以该敏感性基线为基准,计算各菌株的抗性指数(RF),结果显示供试的122个菌株抗性指数均小于5.0,根据FAO抗药性评价标准均属敏感菌株。在吡唑醚菌酯中加入10μg·mL-1水杨肟酸(SHAM)后,这些菌株的EC50平均值下降为0.1868±0.0076μg·mL-1,表现出明显的协同增效作用。通过药剂驯化从10株敏感菌株中获得4株抗吡唑醚菌酯的高等抗性菌株,抗性指数在105.59217.21之间。这4株抗吡唑醚菌酯菌株的抗药性比较稳定,在无药培养基继代培养9代后均均能保持高水平抗性。与亲本敏感菌株相比,抗性菌株除了孢子囊直接萌发率及休止孢子萌发率等方面存在显著下降的现象外,其余生物学特性基本一致。3、用CTAB法提取诱导获得的6个醚菌酯和4个吡唑醚菌酯抗性菌株及其敏感菌株的基因组DNA,以引物CytbF和CytbR进行PCR扩增细胞色素b基因(cytb),获得长度约750bp的基因部分片段,比较了其碱基与氨基酸序列后发现:抗醚菌酯菌株并未发生变异,而抗吡唑醚菌酯的菌株则发生了G137R、G143S、A170T及D172N变异。