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目的分析星形胶质细胞与腺苷(adenosine, Ado)对缺氧/复氧神经元损伤的保护作用,探讨腺苷预处理后的星形胶质细胞条件培养液的营养性作用,从而揭示腺苷对神经系统的保护机制,为腺苷应用于临床治疗脑血管疾病奠定理论基础。方法体外培养SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞和海马神经元及大脑皮层神经元,纯化后建立模拟脑缺血再灌注损伤模型,收集再灌注18h的星形胶质细胞条件培养液(Astrocyte conditioned medium, ACM)和经腺苷预处理的再灌注18h的星形胶质细胞条件培养液(ACMa),然后用ACM、ACMa及ACM+a(ACM+含100μmol/L腺苷的DMEM液)以1：5的浓度培养缺氧/复氧损伤神经元；倒置显微镜下观察神经元形态学变化,XTT法测定神经元活性,利用免疫荧光技术和免疫细胞化学技术分别测定NSE、Bcl-2强阳性细胞的表达量。结果光镜观察：正常组神经元生长良好,形态规则,胞体椭圆,折光性好,突触连接紧密呈网状：模型组神经元胞体变大不规则,折光性差,突触明显减少或消失；ACMa组、ACM+a组及ACM组细胞状态介于两者之间,总体肉眼观察,其作用：ACMa>ACM+a>ACM。XTT法细胞活性检测：模型组神经元活力下降,OD值明显低于正常对照组。ACMa组、ACM+a组及ACM组细胞活力均高于模型组,根据OD值,其作用：ACMa>ACM+a>ACM。NSE、Bcl-2的测定：ACMa组、ACM+a组及ACM组神经元表达NSE和Bcl-2的能力均较模型组提高,对染色结果阳性的细胞培养片进行图像分析,其作用：ACMa> ACM+a>ACM。结论1、通过细胞活性检测及受损神经元NSE的表达量反映出ACM对缺氧/复氧损伤的神经元有重要的保护和修复作用：2、.通过受损神经元表达bcl-2的变化表明ACM具有抗凋亡作用；3、星形胶质细胞在脑缺血再灌注损伤中起着重要作用,腺苷可通过星形胶质细胞间接地保护和修复受损神经元。