人类继发现红细胞血型之后,至20世纪末,已发现29个血型系统,600多种抗原决定簇。血型糖蛋白A(GPA)和血型糖蛋白B(GPB)是人红细胞膜蛋白的主要成分,也是红细胞分化的重要分子标志。它们共同构成了红细胞膜上MNSs血型系统。GPA和GPB基因均位于第4号染色体上,其基因结构同源性达60%,本研究通过红细胞免疫,获得4株抗M单抗、1株抗N单抗及3株重要的抗GPA/GPB单抗,为今后MNSs血型系统的研究、鉴定及利用其制备自身红细胞凝集实验中的双功能抗体打下了的基础。同时本研究还通过RT-PCR的方法,从以上获得的抗GPA/GPB的单抗中成功扩增出其重链及轻链的可变区,通过短肽连接获得了相应的单链抗体,该抗体能与所有类型的红细胞结合。在此单链抗体的基础上,本研究还利用了重组DNA技术将链霉亲和素与之进行原核表达,所获得的融合蛋白一方面能与红细胞结合,另一方面能与链霉亲和素结合,再在生物素标记的抗体的存在下,可以介导产生肉眼可见的红细胞凝集反应。通过血凝反应来判定特异性抗体或抗原的阳性或阴性。最终获得的单链抗体与链霉亲和素的融合蛋白,作为双功能抗体起到中间桥梁作用,将自身红细胞凝集反应与生物素亲和素系统的优点结合起来。