小鼠白介素18瘤苗的构建及抗白血病作用研究

来源 :中国协和医科大学 中国医学科学院 北京协和医学院 清华大学医学部 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hanhaicang
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  我们从小鼠脾细胞克隆proIL-18和ICE基因,构建小鼠proIL-18和ICE共表达质粒,经测序证实序列正确后,脂质体法转染小鼠淋巴细胞白血病细胞系L1210,筛选稳定表达细胞株。转染细胞RT-PCR及转染细胞培养上清IL-18ELISA检测结果表明,肿瘤细胞可以表达并分泌成熟的IL-18。IL-18白血病瘤苗的成功制备表明,利用pIRES载体在同一肿瘤细胞中共表达的proIL-18和ICE能够完全模拟生理过程,在真核细胞内有效酶切,分泌出成熟并有功能活性的IL-18。随后进行小鼠体内抗白血病效果评价。致瘤性实验和免疫保护实验结果显示,与对照组相比,稳定表达pIRES-proIL-18-ICE的瘤苗能明显延长小鼠存活时间,部分小鼠长期生存,经野生型L1210二次攻击后部分小鼠仍能长生存。表明构建的IL-18瘤苗具有明显的抗白血病效应。初步抗肿瘤机制研究显示,转染空载体及目的基因并未改变肿瘤细胞表面MHCI类、MHCⅡ类(Ⅰ-Ad)分子及共刺激分子(CD80,CD86)的表达,不同接种组小鼠脾脏淋巴细胞培养上清的IFN-γ含量也无显著性差异,提示抗肿瘤作用不是通过上调肿瘤细胞MHC及共刺激分子实现,且与IFN-γ无关。
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