临床工作中遇到的癌症患者在确诊时大多已有转移。这是癌症治疗过程中一个极为复杂和重要的问题，尽管原发肿瘤可经手术切除或进行放疗、化疗及免疫治疗，但转移瘤往往对以上措施效果不佳。临床观察表明大多数患者死于转移。原发性肺癌是一种常见的恶性肿瘤，发病率逐年上升，现已成为恶性肿瘤死亡率最高的肿瘤之一。在肺癌治疗中外科手术十分重要，术后辅助化疗和放疗可以减少局部复发的可能，但不提高生存率。单纯的外科治疗是Ⅰ期、Ⅱ期非小细胞肺癌的最佳治疗选择，但50％临床Ⅰ期病人仍死于复发，表明虽然手术是肺癌最好的治疗方法，但术后转移复发是肿瘤死亡的主要原因，能否对肺癌术后患者的复发转移进行成功防治，是治疗肺癌的关键之一，是当前研究的重要课题。 细胞粘附分子(CAM)是参与细胞-细胞以及细胞-基质之间作用的一类粘附物质的总称，包括钙粘附素族、整合素族、免疫球蛋白超家族、选择素族、透明质酸受体类(CD44)及其他CAM。近年来的研究表明CAM在肿瘤侵袭和转移中发挥着重要的作用，肿瘤细胞与血管内皮细胞间的相互粘附作用被认为是肿瘤血行转移的关键步骤，抑制它们之间的相互作用对探讨肿瘤的转移机制及建立药物的调控作用具有重要的意义。 细胞间隙连接通讯(gap junction intercellular communication，GJIC)是细胞间的一种重要连接方式，在细胞分化，生长控制及维持体内环境平衡等方面起重要作用。GJIC有同源性和异同源性，以往一些研究显示，GJIC与肿瘤的生长和转移相关。在肿瘤的生长中，同源性和异同源性GJIC异常先于肿瘤形成，与维持肿瘤的表型有关。一些实验表明，肿瘤细胞与血管内皮细胞间的通讯由间隙连接通道介导，肿瘤细胞代谢产物从胞浆向血管内皮细胞传递通过诱导局部内皮细胞回缩和内皮下基质暴露于粘附的肿瘤细胞而影响肿瘤细胞的外侵。 为了探讨这些机理，我们在体内外研究了肿瘤细胞转移潜能与GJIC和CAM的关系。 一、肺癌PG细胞生长、转移的相关机理及药物的调控研究 1．实验方法 探讨细胞内 Ca”浓度、CD44表达、细胞间隙连接通讯及其蛋白在肺癌转移中 的作用。采用MTT法体外观察不同浓度茶多酚对PG细胞的杀伤作用；应用激光共 聚焦显微镜和流式细胞仪分析，检测用药后PG细胞内Caz”浓度、CD44表达、细胞 增殖周期分布以及细胞间隙连接通讯的变化。 2．实验结果f 4个浓度的茶多酚对PG细胞均有杀伤作用，呈剂量依赖关系。细胞增殖受到 明显抑制，使细胞阻滞于 GO几 期，不能进入 S期及 GZ／M期，细胞增殖指数明显 下降。细胞内Caz”浓度、GJIC功能和CX43与对照组相比，逐渐上升；CD44表达水 平则呈逐渐下降。 二、粘附分子、细胞间隙连接通讯在肺癌血行转移作用中的实验研究 1．实验方法 应用共聚焦显微镜和流式细胞仪双荧光标记法，体外研究不同转移性肺癌细 胞与血管内皮细胞的粘附性、细胞间隙连接通讯及粘附分子表达水平，并检测茶 多酚和丹参对上述过程的影响。 2．实验结果 高转移性肺癌细胞炉G细胞）与血管内皮细胞的粘附能力、间隙连接通讯功能 和粘附分子表达水平（CD44、CD54）明显高于低转移性的肺癌细胞① 细胞）。当血 管内皮细胞被u（0．sug／ml）激活后，PG细胞与其的粘附性、间隙连接通讯功能 和粘附分子表达较激活前明显增加。茶多酚和丹参对PG细胞与血管内皮细胞的粘 附性、间隙连接通讯功能具有明显的抑制作用，并可抑制粘附分子CD44、CD45的 表达，呈剂量依赖关系。 三、间隙连接蛋白、E－钙粘素在肺癌组织中的表达及临床意义 1．实验方法 采用免疫组化ABC法检测 5（川39原发性肺癌组织中 CX43和卜钙粘素的表达情 况，并分析了它们表达与肺癌临床病理的关系。 2．实验结果 2 随着肿瘤进展，CX43和卜钙粘素表达逐渐降低，CX43和卜钙粘素在 1、11 期非小细胞肺癌中阳性表达率明显高于＊、IV期；中高分化的肺癌其CX43、E－钙 粘素阳性表达率明显高于低分化的肺癌；肺癌伴淋巴结转移者的卜钙粘素表达水 平低于无淋巴结转移者：CX43表达与肺癌有无淋巴结转移无明显相关性。CX43在 肺腺癌组织中的阳性表达率明显高于鳞癌和大细胞未分化癌（P＜0．05）。E－钙粘素 的表达与非小细胞肺癌的组织类型无明显相关性。 四、共聚焦显微镜定量检测间隙连接蛋白、E－钙粘素在肺癌中的表达11．实验方法 本?