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目的: 二妙散由黄柏和苍术等份组成，黄柏为君药，苍术为臣药，是中医用于治疗湿热下注证的首选方剂，具有清热燥湿的功效，作用显著，临床应用广泛。本课题围绕二妙方（二妙散提取物）体外、体内多种成分定量分析，初步药效学作用展开研究，以探索入血成分体内外配伍规律，阐述复方及单药的配伍关系，为二妙制剂的新药研发、临床合理用药提供有益的参考。 方法: 1.采用液质联用技术，建立同时测定二妙方中14种成分的UPLC-MS/MS分析方法;对5批次二妙方进行14种成分的定量分析，比较复方及单药中各成分变化。 2.建立同时测定二妙方6种生物碱类入血成分的UPLC-MS/MS分析方法;SD大鼠单次口服灌胃给药二妙方及黄柏，测定各个时间的血药浓度，以Kinetica4.4TM软件计算相关药动学参数;观察6种成分的剂量依赖关系，比较配伍前后6种成分的药代动力学差异。 3.高脂饲喂ICR小鼠16天，口服灌胃二妙方（提取物）、二妙散（原方）、黄柏、苍术予以改善治疗。检测血清生化指标;进行在体糖耐量试验;沿HSL脂解通路，确认二妙方是否抑制脂解;测定肝脏中DAG含量及PKC-ε、Akt蛋白表达，探索二妙方是否具有改善肝胰岛素抵抗的作用;沿Insulin-Akt-FOXO1或GSK3路径观察糖异生或糖原合成;比较二妙方及二妙散的药效作用;比较复方及拆方后单味药的药效作用差异，探讨配伍作用。 结果: 1.所建立的UPLC-MS/MS分析方法灵敏度高、准确可靠、满足分析要求;单因素试验优选最佳提取方法如下:0.1g二妙方细粉加50mL的50％甲醇超声提取60 min。该方法可用于不同批次二妙方14种成分的准确定量分析;配伍后有利于复方中黄柏碱、木兰花碱、白术内酯等成分的溶出。 2.所建立的UPLC-MS/MS分析方法满足生物样本分析要求，方法稳定可行、准确可靠，可用于二妙方中6种生物碱类入血成分的定量分析。复方中6种生物碱血药浓度较低（Cmax约1-40 ng/mL），Tmax约3-4 h;四氢巴马汀吸收较快、体内驻留时间短（MRT约为4 h）;其余5种在体内驻留时间均较长(MRT约20-40 h)。小檗碱、黄柏碱、巴马汀、木兰花碱、四氢巴马汀、药根碱在体内的吸收程度(AUC0-t)与给药剂量(Dose)之间呈线性关系(R＞0.9)，显示剂量依赖性。配伍后小檗碱、黄柏碱、巴马汀、药根碱的Tmax和MRT延长、AUC增大（P＜0.05）、CL降低(P＜0.05)，木兰花碱的Tmax和MRT延长，配伍后上述成分在体内吸收和消除速率降低，作用更持久，提高了生物利用度。 3.高脂饲喂小鼠16天，导致小鼠体内脂质异位沉积至肝脏，产生胰岛素抵抗。二妙方降低了血清中FFA、TG、GL含量(P＜0.05)，具有抑制脂解的作用，能够改善葡萄糖耐量(P＜0.01);降低肝脏组织DAG水平(P＜0.01)，抑制PKC-ε信号通路的激活，改善肝脏Akt胰岛素信号损伤(P＜0.05)，促进糖原合成抑制了糖异生作用，降低胰岛素抵抗引起的血糖升高。二妙方的作用效果与二妙散相当甚至更优;二妙方与单药均具有一定程度的改善肝脏胰岛素抵抗作用，在某些调节位点上，复方显示出了协同增强的作用。 结论: 对二妙方中14种成分的定性、定量分析，系统的评价了该复方质量，确认了可能的物质基础。阐述了二妙方及黄柏中6种生物碱类入血成分的药代动力学特征，经过体内配伍研究，证明了苍术能够延缓生物碱在体内驻留时间，降低清除率，提高了生物利用度，从而推测配伍有助于入血活性成分药效作用的发挥。二妙方能够抑制脂解、进一步改善肝脏胰岛素抵抗，药效与二妙散相当甚至更优;与单药相比，复方在某些调节位点上显示出了协同增强的作用，显示出一定的配伍优效性。