黄粉虫蛋白质提取及蛋白粉制备工艺研究

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黄粉虫是一种集高营养价值和多种保健功能于一身的资源昆虫,具有较高的利用价值,是一种未被充分利用的蛋白资源。本文以黄粉虫幼虫为原料,研究了黄粉虫脂肪的脱除、蛋白的提取、初步分离纯化及蛋白粉制备工艺,以期为开发利用我国丰富的昆虫资源提供一定的实验和理论依据。首先,通过有机溶剂萃取法和超临界流体CO2萃取法对黄粉虫脂肪的脱除工艺进行了探讨,得出有机溶剂法脱除黄粉虫脂肪的最佳工艺参数为:以无水乙醚作萃取溶剂,萃取温度为40℃,料液比为1:6,萃取时间为3h,此条件下,萃取率达31.76%;超临界流体CO2萃取法最佳工艺参数为:萃取压力30MPa、CO2流量20L/h、温度35℃、时间2.5h。该条件下萃取率为30.45%。两种方法都可达到较好的脂肪脱除效果,但溶剂法提取的油脂品质较差,蛋白质损失较大,超临界萃取技术高效、清洁,但成本较高。本课题为避免后序蛋白提取时,蛋白损失率过大,所以采用超临界萃取技术脱除黄粉虫油脂。以脱除脂肪的黄粉虫为原料,本课题设计了碱提、盐提、酶解三种方法分别提取黄粉虫蛋白质,得出碱提法的工艺条件为:碱液浓度为1.0%、时间2h、温度50℃、料液比1:15的条件下,黄粉虫蛋白质的提取率为77.8%;盐提法的工艺条件为:采用1.0%NaCl溶液,浸提温度40℃,料液比为1:20的条件下提取黄粉虫蛋白3h,提取率可达52.5%;酶解法的工艺条件为:以胰蛋白酶为作用酶,加酶量为1.5%、温度55℃、料液比1:10、时间5h、pH值8.0的条件下,提取率为73.8%。通过比较得出,酶法提取蛋白工艺优于碱法、盐法。为进一步优化酶解工艺,本文分别从脱脂、浸提、双酶水解、添加金属离子等方面进行了提高提取率的探讨。在提取粗蛋白的基础上,本文对黄粉虫蛋白质的初步分离纯化进行了研究。用3%活性炭,30℃下脱色2h,并用等电点-盐析法富集蛋白质沉淀,透析脱盐,经Sephadex G-75柱层析对蛋白进行分级分离,没有达到分离效果。进一步采用DEAE-纤维素离子交换柱进行分级分离,可得到多个蛋白峰。采用热风干燥、冷冻干燥、喷雾干燥制备黄粉虫蛋白粉。通过对比,得出热风干燥制得的产品品质较差,冷冻干燥制得的产品品质较好,但成本较高,而喷雾干燥在产品品质和成本方面,都具有较好优势。通过实验得出制备黄粉虫蛋白粉的最佳工艺为:选用喷雾干燥法,在原料浓度30 %~40 %、进料温度在45℃、进出口温度180-73℃、进料量20mL/min的条件下,可达到较好的喷雾干燥效果。
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