冬虫夏草(Cordyceps sinensis)是我国传统的名贵中药,因其含有特殊的化学成分而具有独特的药理作用,受到人们的青睐。由于天然冬虫夏草资源的匮乏,人工培育冬虫夏草便成为一个亟待解决的重要课题。在人工培育冬虫夏草的环节中,冬虫夏草菌制剂是关键的环节之一。为此,本实验探讨了配制冬虫夏草菌油混悬剂的工艺配方以及优化固体发酵条件与建立发酵动力学数学模型,为进一步研究冬虫夏草菌制剂和固体发酵生产分生孢子提供理论基础。冬虫夏草人工培育中,接种侵染率一直是制约其规模化生产的重要因素。本次试验利用油混悬剂独有的剂型特性可提高人工培育冬虫夏草中的接种率,采用正交试验设计,应用数学软件MATLAB极差分析法,根据综合平衡法原则,筛选出冬虫夏草菌油混悬剂最优的组合方案,即菜籽油与邻苯二甲酸二丁酯(7∶3)复合油10g,固液比1.0∶10,十二烷基硫酸钠0.9g、脂肪醇聚氧乙烯醚0.5g、硬脂酸铝0.6g,其制剂的沉降体积比和再分散性分别高达97%和100%。稳定性试验表明,该油混悬剂具有很好的贮藏稳定能力,可保存1-2月。在冬虫夏草菌油混悬剂研究的基础上,进一步对油混悬剂的活力水平进行了考察,研制高活力冬虫夏草菌油混悬剂以推动其产业化的发展。根据油混悬剂的特殊性,对MTT法进行改进及优化,结果为:反应时间120 min、反应温度37℃、以甲苯为萃取剂,活细胞量与琥珀酸脱氢酶活力线性相关。依据该方法筛选制剂中助剂的种类及浓度,并通过正交试验进一步优化,获得冬虫夏草菌种油混悬剂高活力配方为:菌种量0.15 g/mL、硬脂酸铝60 mg/mL、司班-80 50μL/mL。经活力水平实验表明,油混悬制剂活力水平相对于纯细胞来说保持在95%-89%之间,具有较高的细胞活力。通过稳定性试验表明,该制剂在4℃下保存1个月,活力水平仍能维持90%左右。对冬虫夏草菌固体发酵条件进行了优化。通过对比试验结果得出:最佳碳源为葡萄糖,最佳氮源为酵母浸粉。同时,探讨了冬虫夏草菌在固体平面培养基上的动力学模型,利用MATLAB软件进行非线性最小二乘法拟合得到了菌体和分生孢子生长的动力学数学模型,为掌握冬虫夏草菌固体发酵的本质特征,为发酵过程的进一步扩大、过程控制优化及提高产量奠定了基础。