犬吻蝠属蝙蝠胰核糖核酸酶的分子进化及功能研究

来源 :沈阳农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:achun5808
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蝙蝠隶属于翼手目,是适应能力很强的一类动物,几乎在全世界都能看到它们的身影,它们的食性非常广泛,包括食虫、食果、食蜜等。胰腺核糖核酸酶(RNase1)是研究很深入的一类酶家族,它们具有降解RNA病毒的能力,因此研究人员认为其具有与免疫相关的功能。同时,研究发现RNASE1基因在一些反刍动物及叶猴中发生了基因复制和适应性进化,后来研究人员发现它们产生的新RNase1可能与消化功能相关此外,在其他类群中也发现了RNASE1复制基因,比如在食肉目中,产生的新RNase1也可能与消化功能相关。另外,研究人员发现在犬吻蝠属蝙蝠中存在大量且进化速率较快的RNASE1复制基因,但并没有对其功能进行验证。本研究对巴西犬吻蝠(Tadarida brasiliensis),普通吸血蝠(Desmodus rotundus),普通长翼蝠(Miniopterus fuliginosus)的RNASE1序列进行扩增,并通过数据库下载序列的方法共获取到35种蝙蝠的RNASE1序列。结果在巴西犬吻蝠中又发现了两个新拷贝,分别将其命名为Tadarida brasiliensis-β4和Tadarida brasiliensis-β5,在普通长翼蝠中发现了两个拷贝分别将其命名为Miniopterus fuliginosus-α和Miniopterus fuliginosus-β,而在普通吸血蝠中只存在一个RNASE1基因。通过构建RNase1氨基酸树发现,现生犬吻蝠属蝙蝠RNase1-β类及其祖先枝枝长较长,现生犬吻蝠属蝙蝠RNase1-α类及其祖先枝枝长较短。另外,此研究进一步证明犬吻蝠属蝙蝠RNASE1-β类受到了显著的正选择。本论文以巴西犬吻蝠为代表物种,对其祖先RNASE1序列进行推测和体外表达,并对巴西犬吻蝠RNase1及其祖先RNase1在不同pH环境下降解tRNA的活性进行测定。酶活性测定结果显示RNase1-β类的最适pH向酸偏移,而RNase1-α类的最适pH向碱偏移,这很可能与其功能的变化有关。我们推测最适pH偏酸的RNase1可以更好地适应消化道内的环境,提高它们降解食物RNA的效率。而最适pH偏碱的RNase1可能继承祖先RNase1免疫的功能,继续行使抗病毒相关的功能。
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