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研究背景:脑缺血再灌注虽然可以挽救濒临死亡的神经细胞,但与此同时又可加重对缺血细胞的损伤,导致严重的迟发型神经元损伤,影响患者的预后和功能恢复,即再灌注损伤。它是由多种原因引起的复杂的病理生理过程,大量研究表明,在缺血再灌注时会伴随大量活性氧自由基(ROS)的产生,通过氧化反应与脑组织中的脂质、DNA和蛋白发生反应,导致细胞坏死和凋亡,是造成脑损伤的重要机制。红细胞系-2 p45(NF-E2)相关因子-2(nuclear factor erythroid-2 related factor2,Nrf2)是一种可以调节许多抗氧化基因转录的转录因子,其转录产物可通过一系列的酶促反应降低ROS的含量。因此,增强脑缺血再灌注后Nrf2的表达进而降低ROS的含量势必会对改善脑缺血疾病的预后有着重要的意义。脂氧素(Lipoxins,LXs)是体内一种重要的脂质抗炎物质,被称为炎症反应的“刹车信号”。我们认为脂氧素很可能通过上调Nrf2的表达对脑缺血再灌注引起的氧化应激和炎症反应起到保护作用。 目的:探讨脂氧素对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其对Nrf2和P62的调控作用。 方法:采用线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO)再灌注模型,实验分为三组:假手术组(sham),模型组(I/R),脂氧素组(LXA4),用2,3,5三苯基氯化(TTC)染色观察梗死灶面积,用Western Blot法检测组织中总Nrf2蛋白,核内Nrf2蛋白以及总P62蛋白的表达。提取大鼠大脑皮层原代的星形胶质细胞,分为三组:空白对照组,缺氧缺糖(oxygen-glucose deprivation,OGD)组,OGD+脂氧素组,用Western blot法检测细胞内总Nrf2蛋白以及细胞核Nrf2蛋白的表达,用RT-PCR法检测细胞内P62基因的表达。 结果:(1)与模型组相比,脂氧素组梗死灶面积明显减小。 (2)在动物组织中,与模型组相比,脂氧素组Nrf2,P62表达上调。 (3)在动物组织中,与模型组相比,脂氧素组核内Nrf2表达上调。 (4)在星形胶质细胞内,与OGD组相比,OGD+脂氧素组Nrf2蛋白表达上调。 (5)在星形胶质细胞内,与OGD组相比,OGD+脂氧素组细胞核内Nrf2蛋白表达上调。 (6)在星形胶质细胞内,与OGD组相比,OGD+脂氧素组P62基因表达上调。 结论:脂氧素对脑缺血具有保护作用,通过上调Nrf2和P62的表达来减轻氧化应激对脑组织的损伤可能是其机制之一。