生殖生物学是水产经济动物养殖的重要基础学科之一,是人工繁育的重要基础,而性腺发育与免疫防御机理又是生殖与免疫研究领域的热点问题。中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)是我国重要的水产经济甲壳动物,本论文以该蟹卵黄蛋白原为切入点,探讨了卵黄蛋白原及其受体的表达模式与抗菌机制。本实验首先克隆获得了中华绒螯蟹卵黄蛋白原基因(Es-vtg1)的cDNA全序列,该基因全长7939 bp,ORF区包含2567个氨基酸。生物信息学分析发现,该基因包含三个结构功能域:LPD_N结构域、DUF1943结构域及VWD结构域。序列比对显示,Es-vtg1的结构在甲壳动物中是高度保守的。实时定量PCR和Western Blot显示Es-vtg1主要表达在卵巢、肝胰腺以及血淋巴中,其他组织也有少量表达;血淋巴免疫荧光实验显示,血淋巴中的Es-vtg1主要表达于细胞质,而卵巢组织则主要表达于细胞核内,且在发育期间随着卵巢的发育进行快速的积累。另外,本实验克隆获得了卵黄蛋白原受体(Es-vgr)的cDNA部分序列,荧光实时定量PCR和Western Blot结果显示,Es-vgr仅在中华绒螯蟹卵巢组织中特异性表达,暗示Es-vgr参与了卵巢发育过程;同时也发现,随着卵巢的发育Es-vgr表达量逐渐升高,在卵巢发育后期表达量又有所下降。而Es-vtg1的表达趋势与Es-vgr类似,暗示Es-vtg1与Es-vgr共同参与了调控卵巢发育过程。体外干扰中华绒螯蟹卵巢组织Es-vtg1后,利用实时荧光定量PCR检测到Es-vgr的表达量显著下降,这一研究结果暗示了Es-vtg1一定程度可以调控Es-vgr的表达。最后,本实验利用了金黄色葡萄球菌和副溶血弧菌对中华绒螯蟹体外培养的血淋巴进行了48 h的攻毒实验,发现Es-vtg1在mRNA水平上的表达量显著上升(P<0.01),而菌结合实验也证实Es-vtg1能够广泛性地结合革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌以及真菌,且含有VWD结构域的原核表达蛋白能够抑制菌的生长。在此基础上,进一步通过体外干扰中华绒螯蟹血淋巴Es-vtg1,并进行菌刺激,结果发现部分抗菌肽表达量下调。这些研究结果表明Es-vtg1具有重要的抗菌功能。