目的观察黄芪对临床皮肤修复的作用,并通过体外分离培养大鼠毛囊干细胞（rHFSCs）、制备黄芪甲苷缓释微球、3D打印皮肤模型的方法进一步探究黄芪中有效成份黄芪甲苷与rHFSCs在皮肤修复中的作用,建立新型高效组织工程皮肤指导临床皮肤修复。方法临床收集30例来自浙江中医药大学附属江南医院的皮肤缺损病例,分为治疗组和对照组,观察比较每组患者创面愈合时间、愈合率、瘢痕情况、安全性指标和不良反应事件来探究黄芪对皮肤缺损修复的影响。通过rHFSCs体外培养技术得到稳定、纯度高、增值性强的rHFSCs,通过流式细胞和免疫荧光检测法联合鉴定rHFSCs。为进一步明确黄芪有效成份对创面修复的影响,制作黄芪有效活性提取物黄芪甲苷的缓释微球,测量其包封率、载药率和体外缓释速率,并梯度干预rHFSCs观察细胞增值速率;3D打印技术制作三维皮肤支架,种植rHFSCs于支架表面,观察两者生物相容性。取12只6周龄裸鼠,分为A空白组、B空载支架组、C rHFSCs/黄芪甲苷缓释微球/3D支架皮肤模型组,采用EDU标记毛囊干细胞,在7、14、21天从大体、组织学观察裸鼠创面的修复情况,探究黄芪提取物与毛囊干细胞在创面修复中参与的过程。结果在临床实验中,实验组平均创面愈合时间31±7.32天,对照组为43±6.79天,P＜0.01有显著差异;两组创面愈合率在1周P＞0.05无差异,在2、4周,两组均P＜0.05有差异。治疗组平均瘢痕评分为4.07±1.27,对照组为6.60±1.76,P＜0.05具有统计学意义。体外分离、培养、纯化的rHFSCs克隆能力好,活性强,且毛囊干细胞特异性标志物CK15、P63、Integrinα6、Integrin β1呈高表达;黄芪甲苷缓释微球包封率72.677%,载药率1.245%,12h释放量为5.78%,21天累积释放率高达81.86%;黄芪主要提取物黄芪甲苷微球浓度在5μg/mL和10μg/mL时对rHFSCs的增值和活性有不同程度的促进作用,rHFSCs紧贴支架表面呈簇状生长。在动物实验中,第7天各组之间创面愈合率P＞0.05没有统计学差异;第14、21天均是rHFSCs/黄芪甲苷缓释微球/3D打印支架皮肤模型组愈合率最高、更接近正常皮肤;创面HE染色、CD31免疫组化、免疫荧光染色以及EDU细胞追踪显色结果均显示皮肤模型系统组形成更多类毛囊组织、新生血管能力最强。结论临床观察到黄芪可以加快创面愈合速率,使创面更接近正常皮肤组织;实验室结果显示运用成熟的毛囊干细胞体外培养技术可以稳定地得到纯度高、增值性强的rHF-SCs;3D打印皮肤支架生物相容性好;黄芪有效成份黄芪甲苷可以促进rHFSCs的增值,共同参与创面修复时类毛囊及血管形成,从而促进创面修复;该rHFSCs/黄芪甲苷缓释微球/3D打印支架新型组织工程皮肤模型能促进裸鼠创面愈合。