壳聚糖、明胶-硅氧烷纳米颗粒作为基因治疗载体的制备与表征

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基因治疗的提出为人类医学的发展提供了一种新的治疗手段。基因治疗载体是基因治疗中关键的因素之一。目前,基因治疗载体分为:病毒载体和非病毒载体。尽管病毒载体具有较高的转染效率,但易引起免疫反应和致癌作用;而非病毒载体如壳聚糖、明胶载体等具有良好生物相容性,但其粒径高达几百纳米至几个微米,不利于细胞对载体的摄取。因此,为了促进载体的细胞内化过程,本文旨在开发出粒径在100nm以下的新型壳聚糖、明胶-硅氧烷纳米颗粒,为基因治疗的发展提供新型的载体。 本文的主要研究结果如下: 1)成功制备出粒径在100nm以下的壳聚糖-DNA纳米颗粒,其表面电位呈正电性。 2)壳聚糖-DNA纳米颗粒能够稳定存在于不同pH值的磷酸盐缓冲溶液、血清和DNaseⅠ酶溶液中,对DNA具有良好的保护作用。 3)壳聚糖-DNA纳米颗粒能够将质粒DNA(pEGFP)成功转运进入细胞,并表达出绿色荧光蛋白,其转染能力具有细胞依赖性。 4)采用溶胶-凝胶法成功制备出粒径分布在100nm以下、规则球形的明胶-硅氧烷纳米颗粒,并探讨了其合成机理和影响因素。 5)成功制备出粒径分布在100nm以下明胶-硅氧烷纳米颗粒-DNA复合物,其表面呈正电性。 6)明胶-硅氧烷纳米颗粒-DNA复合物能够稳定存在于血清和DNaseⅠ酶溶液中,对DNA具有很好的保护作用。
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