【摘 要】
：
目的:分子靶向治疗由于其安全性和有效性等特点,已被应用在包括非小细胞肺癌（Non small cell lung cancer,NSCLC）在内的多种肿瘤的临床治疗中。吉非替尼是第一个获批上市的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂,临床应用取得了较好的疗效,已成为EGFR基因突变的晚期NSCLC患者的一线治疗方案。但是多数患者会在接受吉非替尼治疗一段时间后出现耐药的现象。MicroRNA能够通过沉默其
论文部分内容阅读
目的:分子靶向治疗由于其安全性和有效性等特点,已被应用在包括非小细胞肺癌（Non small cell lung cancer,NSCLC）在内的多种肿瘤的临床治疗中。吉非替尼是第一个获批上市的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂,临床应用取得了较好的疗效,已成为EGFR基因突变的晚期NSCLC患者的一线治疗方案。但是多数患者会在接受吉非替尼治疗一段时间后出现耐药的现象。MicroRNA能够通过沉默其靶基因参与几乎所有的生理或病理性生物学功能的调控。近期的研究发现,多种microRNAs参与了NSCLC中吉非替尼耐药性的形成和维持。本研究拟构建NSCLC吉非替尼耐药的microRNA-靶点调控网络。并明确miR-342-3p在NSCLC细胞对吉非替尼耐药性的形成和调节中的作用以及相关的分子机制,从而为阐明NSCLC的分子靶向治疗耐药的机制提供新依据。方法:1.整合分析NSCLC表达谱的数据集,鉴定差异表达基因。2.对差异表达基因进行GO功能注释及KEGG富集分析。3.构建NSCLC吉非替尼耐药的microRNA-靶点调控网络。4.A549和PC9以及吉非替尼耐药的A549/GR和PC9/GR细胞的培养。5.实时定量PCR检测miR-342-3p和CPA4 mRNA的表达。6.将microRNAs或质粒转染A549/GR和PC9/GR细胞。7.CCK8实验检测A549/GR和PC9/GR细胞的细胞活力以及对吉非替尼的敏感性。8.荧光素酶报告实验检测miR-342-3p调控CPA4的作用及位点。9.Western blotting检测CPA4蛋白的表达。结果:1.鉴定了NSCLC吉非替尼耐药的差异表达基因。2.构建了NSCLC吉非替尼耐药的microRNA-靶点调控网络。3.对差异表达基因进行了GO功能注释及KEGG富集分析。4.MiR-342-3p在耐药的A549/GR和PC9/GR细胞中的表达显著高于其在亲本细胞A549和PC9中的表达（P<0.05）。5.Mi R-342-3p过表达能够降低A549/GR和PC9/GR细胞对吉非替尼敏感性,增强对吉非替尼的耐药性（P<0.05）;miR-342-3p沉默能够显著提高A549/GR和PC9/GR细胞对吉非替尼敏感性,抑制对吉非替尼的耐药性（P<0.05）。6.MiR-342-3p能够负性调节CPA4基因m RNA和蛋白的表达（P<0.05）。7.荧光素酶报告基因实验显示miR-342-3p能够靶向结合CPA4基因3’UTR区域（P<0.05）。8.与miR-342-3p mimic+pC-NC组的A549/GR和PC9/GR细胞相比,miR-342-3p mimic+pC-CPA4组A549/GR和PC9/GR细胞中CPA4蛋白的表达上调（P<0.05）。9.与miR-342-3p mimic+pC-NC组的A549/GR和PC9/GR细胞相比,miR-342-3p mimic+pC-CPA4组A549/GR和PC9/GR细胞对吉非替尼的敏感性显著提升,对吉非替尼的耐药性降低（P<0.05）。结论:鉴定了NSCLC吉非替尼耐药的差异表达基因,构建了NSCLC吉非替尼耐药的microRNA-靶点调控网络,并对差异表达基因进行了GO功能注释及KEGG富集分析。MiR-342-3p能够通过沉默其靶基因CPA4降低NSCLC吉非替尼耐药细胞对吉非替尼的耐药性。
其他文献
口语交际水平是青少年学生语文素养与综合能力的重要衡量依据之一。6至13岁是青少年学生口语交际能力培养的黄金时期,基于此,教育部在部编版教材的编纂过程当中,对口语交际模块进行系统性与科学性兼具的设计与规划。部编版教材当中口语交际模块内容与教学目标的设计均参考所对应学生群体的身心发育与认识现状,与学生群体之间有着极高的契合度。文章通过思维导图的应用,实现教材中口语交际内容设计意义的最大化。
肺癌是全世界范围内发病率和死亡率最高的恶性肿瘤之一,非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）在肺癌的分类中占多数。随着免疫疗法和分子靶向治疗等个体化的治疗方案越来越精细,我们对肺癌发生发展的分子机制、潜在的生物学标记物的认识有了进一步提高。但仍迫切需要发现更多的对于肺癌早期诊断及判断预后有意义的新的标记物,探索并阐明其对肺癌发生发展过程中的作用以推动肺癌治疗
目的:肺癌是全世界最常见的恶性肿瘤之一,也是癌症相关死亡的主要原因,其中腺癌是主要的病理亚型。在肺腺癌患者中,经常观察到EGFR突变,例如第19外显子的框内缺失和第21外显子的858位密码子内的核苷酸取代。对于具有EGFR致敏突变的肺腺癌患者,EGFR-TKIs药物埃克替尼等已普遍用于一线治疗。不幸的是,大多数治疗有效患者最终会在10-16个月内获得EGFR-TKI耐药。因此,EGFR-TKIs耐
目的:采用多中心、前瞻性的研究,对入院慢阻肺急性加重患者通过血清学、荧光定量PCR及尿抗原等多种检测方法,获取慢阻肺急性加重患者非典型病原体的病原学流行病学数据,并同步分析患者的临床资料,从而掌握慢阻肺急性加重患者的非典型病原体分布情况及临床特点,提出非典型病原体感染的经验型判断指标。研究方法:在我国8个城市10家医疗机构从2016年3月至2018年11月的时间内收集慢阻肺急性加重病例的标本（血清
"知识的本身就是活动、动作和思维三者之间的密不可分。"皮亚杰这一流传甚远的舶来语论断,深刻地揭示了无论知识本身还是知识学习,始终离不开人的"思维活动"。思维活动是客观存在的,也是可触可感、可亲可近的,却具有"不可视性"特征。如何把这种"不可视性"转化为"可视性思维",更好地激励与引领小学生的学习活动呢?这是一项有利于教与学相长的重大艺术性课题。本文结合小学语文教学的探究与思考,从"思维导图"
深度阅读是小学语文阅读教学中的重要方向,涉及的内容广而杂,学生要吸收的信息量非常多。而思维导图作为新型的教学方式能够有效提升学生的阅读效率、阅读深度以及阅读广度,更有利于提升学生的发散思维,能够培养出良好的阅读素养。
近年来,跨境电子商务已成为我国外贸领域中新的经济增长点,也得到了国家政策的大力支持。本文从我国跨境电子商务的发展历程入手,结合大量最新数,据梳理了我国近一年来的跨境电子商务发展现状,并提出了三个在发展中存在的主要问题,希望为今后继续探讨跨境电商发展奠定了基础。
目的了解厦门市肺癌患者最新生存率及变化趋势,为肺癌防控策略制定提供依据。方法收集整理2011-2018年厦门市肿瘤登记处肺癌患者资料。用现时法计算观察生存率（OS）、相对生存率（RS）和年龄标化调整相对生存率（ARS）进行评估。结果 2011-2018年,厦门市户籍人群肺癌5年OS、RS、ARS分别为11.94%（95%CI:11.03～12.89）、13.30%（95%CI:12.28～14.3
在传统比较优势不断削弱的背景下,我国要利用数字经济来提升制造业出口竞争力。采用2013—2020年我国各地区微观数据,研究数字经济与我国制造业出口竞争力之间的关系、内在影响机制,以及数字经济与制造业出口竞争力之间关系成立的边界条件。结果发现:数字经济与制造业出口竞争力存在显著的空间正相关性;数字经济能提升所在地区的制造业出口竞争力,对临近地区的制造业出口竞争力也有积极的影响;中介效应检验结果发现,