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快速、高效的分子杂交技术对现代分子生物学及其临床应用的重要性已日渐引起学术界的重视。本论文以聚二甲基硅氧烷(polydimethylsiloxane,PDMS)及载玻片作为加工材料,制作了一种混合效率高、自动化、微型化、成本低廉的气体致动混合装置;在此基础上,将聚丙烯酰胺凝胶作为固定DNA的载体,建立了气动混合加速DNA杂交反应系统,实现了快速、高效的DNA杂交过程。 第一章综述了DNA分子杂交技术的意义、发展历程和常用的杂交方法,介绍了固相三维聚丙烯酰胺凝胶DNA杂交技术的原理,以及微流控芯片阵列DNA杂交方法的研究进展,最后提出本论文的工作目的及设计思想。 第二章介绍了一种以PDMS及载玻片作为加工材料的三层结构的微流控混合芯片。该芯片采用气动振荡方式实现微流体快速混合。给出了用于微流体混合的气动混合装置的一系列参数:PDMS驱动膜厚度、致动气压、致动频率等。在驱动膜厚度为100μm,致动气压为0.08 MPa,致动频率为24Hz条件下,罗丹明6G在19μL的液腔中2s即可实现完全混合。 第三章以聚丙烯酰胺凝胶作为固定DNA的载体,并将上述气动混合器用于DNA杂交,实现了快速、高效的气动混合芯片DNA杂交。优化了反应时间、寡核苷酸浓度等实验条件。在最佳实验条件下,所用样品浓度为40μmol/L,探针浓度为1μmol/L,该气动混合装置上杂交反应进行30s后,荧光信号趋于平稳。相比于30s内42℃常规杂交,动态杂交的荧光信号强度提高了11.5倍。 第四章对本论文建立的气动混合芯片DNA杂交系统进行了总结和展望。