冬虫夏草联合丹参器官保存液对大鼠肝脏保存效果的研究

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目的:研制冬虫夏草联合丹参器官保存液并观察其对SD大鼠离体及活体肝脏的保存效果。方法:(1)按照器官保存液的组成原则研制冬虫夏草联合丹参器官保存液并将其胶体渗透压、PH值和电解质与UW液进行比较。(2)建立SD大鼠肝脏非循环离体灌注模型,观察冬虫夏草联合丹参器官保存液的保存效果。将SD大鼠随机分为3组:乳酸钠林格液组(A组)、UW液组(B组)、冬虫夏草联合丹参器官保存液组(C组),再根据不同的保存时间分别将这3组随机分为保存0、4、8、12、24、48小时6个亚组,每个亚组6只动物。记录胆汁流出量,测定灌注流出液天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、氧自由基代谢产物丙二醛(MDA)含量,测定保存液保存不同时间后PH值和光镜下肝脏组织形态学变化。(3)建立SD大鼠活体肝脏移植模型,观察冬虫夏草联合丹参器官保存液的保存效果。选择保存时间为8小时的肝脏进行原位肝移植。将SD大鼠分为冬虫夏草联合丹参器官保存液组和UW液组,每组15对。观察移植成活率、胆汁分泌量、一般情况,测定SD大鼠成活后一周血液天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清总胆红素(TBIL)和光镜下肝脏组织形态学变化。结果:(1)研制的冬虫夏草联合丹参器官保存液的胶体渗透压、pH、电解质与UW液相近,无统计学差异(P>0.05)。(2)大鼠肝脏非循环离体灌注模型实验中,B、C组保存SD大鼠肝脏的胆汁分泌量大于同期A组(P<0.05),B组与C组之间无统计学差异(P>0.05);ALT、AST、LDH值小于同期A组(P<0.05),B组与C组之间无统计学差异(P>0.05);同期MDA含量B、C组均小于A组(P<0.05),B组与C组之间无统计学差异(P>0.05);SD大鼠肝脏病理损伤评分同期B、C保存组明显小于A组(P<0.05),B组与C组之间无统计学差异(P>0.05)。(3)两种器官保存液保存8小时后进行SD大鼠肝脏移植,两组短期移植成功率无明显差异(P>0.05);移植成活后相同时间胆汁分泌量无明显差异(P>0.05);一周存活率无明显差异(P>0.05),随着存活时间的延长胆汁分泌量逐渐增多且颜色加深,一周时胆汁分泌量与正常组无明显差异(P>0.05);饮食活动渐趋正常。成活一周取其血液检测肝功能提示两组之间无明显差异(P>0.05),且高于正常组(P<0.05),肝脏组织形态学变化无明显差异。结论:研制的冬虫夏草联合丹参器官保存液在48小时内对离体SD大鼠肝脏的保存效果与UW液相近,再灌注后肝细胞胆汁分泌方面略优于UW液。保存8小时后行原位肝移植其短期成活率及肝脏损伤程度与UW液无明显区别。
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