脑血管疾病是当今世界上威胁人类最严重的疾病之一,具有高发病率、高死亡率、高致残率、高复发率和并发症多的特点,对国民健康形成了极大的威胁。在我国,目前其发病率和死亡率已超过肿瘤而跃居第一。代谢综合征(metabolic syndrome, MetS)已被公认为是一种糖尿病前期症候群和心血管病的独立危险因素,其与脑卒中的关系成为近年来研究的热点。因此我们对重庆市主城区渝北、渝中区和高新区6个社区募集2,173例45岁以上居民进行颅内外动脉硬化性血栓性脑卒中以及出血性脑卒中事件随访研究,并分析其与代谢综合征相关危险因素的关系。颅内外动脉粥样硬化是引起缺血性脑卒中的病变基础,是引起脑血管疾病的首要原因,因此对颅内外动脉粥样硬化的研究显得尤为迫切。大量流行病研究证实动脉粥样硬化是一个血管壁慢性炎症性疾病,趋化因子在这一过程中发挥了重要作用。特别是受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(regulated activation normal T cell expressed and secreted, RANTES),参与了动脉粥样硬化发生过程中的两个关键阶段:趋化淋巴细胞向内皮管壁粘附和诱导淋巴细胞穿内皮迁移。并且有研究表明, RANTES编码基因的两个启动子位点多态性-408G/A和-28C/G和冠状动脉性疾病有关。由于动脉粥样硬化是全身性疾病,颅内外动脉粥样硬化和冠状动脉粥样硬化发生具有类似的机理。基于此,我们推测RANTES基因多态性和颅内外动脉粥样硬化发生也有相关性。为明确RANTES表达水平以及启动子基因多态性和颅内外动脉粥样硬化的关系,我们在本研究中,首先观察了颅内外动脉粥样硬化患者外周血RANTES的表达情况并分析了RANTES和其它动脉粥样硬化危险因素之间的关系;然后通过焦磷酸测序法检测RANTES基因多态性,分析RANTES基因多态性与动脉粥样硬化的关系;最后,我们在兔颈动脉粥样硬化模型中,通过拮抗RANTES的作用来观察对动脉粥样硬化发生的影响,进一步探讨验证RANTES对动脉粥样硬化炎性过程的作用。主要结果和结论如下:1.脑卒中与代谢综合症相关危险因素的临床研究本部分研究我们首先对重庆主城区2173例45岁以居民进行卒中流行病学随访调查,并分析卒中和代谢综合征相关危险因素之间的关系,得出主要结论如下:(1)本研究共计2173例研究对象,平均随访时间4.58年,随访期间共有82例卒中发生,其中缺血性卒中发病率分别为男性4.89/1000人·年,女性4.70/1000人·年;出血性卒中分别为2.24/1000人·年和3.19/1000人·年;(2)根据最新的ATPIII诊断标准,代谢综合征总患病率分别为男性19%,女性26%。代谢综合征人群中卒中危险因素的患病率存在性别差异(3)代谢综合征以及其危险因素组件数是卒中事件的危险因素,随着代谢综合征危险因素组件数的增加,缺血性和出血性卒中的发病率随之增加,5年幸存率逐渐降;(4)cox回归分析提示,随着代谢综合征危险因素不同组件数的增加,缺血性和出血性卒中HR值均显著增加;腹型肥胖是缺血性卒中最重要的危险因素组件,其次是代谢综合征本身;对于出血性卒中高血压HR值最高,其次是腹型肥胖。2. RANTES在颅内外动脉粥样硬化外周血表达增高。采用病例对照研究的方法,对大坪医院神经内科178例颅内外动脉粥样硬化患者以及178例年龄、性别匹配的健康对照者外周血RANTES的表达水平进行ELISA法检测。研究结果发现:(1) RANTES在颅内外动脉粥样硬化患者外周血的表达显著高于对照组,两组RANTES的平均浓度分别为46.8±1.9 ng/dL和40.6±1.9 ng/dL,有统计学差异,p<0.05。(2)高浓度RANTES(≥42.3ng/dl)能够增加颅内外动脉粥样硬化发生的危险性,和低浓度RANTES组(<26.3ng/dl)相比危险性比值比OR=3.05,95%CI=1.98-4.68,校正其它因素后OR’=2.70 ,95%CI=1.81-4.03,p<0.001,具有统计学意义;(3)RANTES表达与许多传统的颅内外动脉粥样硬化危险因素如腰围、CRP、TG、WBC、血小板、纤维蛋白原之间有正相关,和HDL水平存在负相关;(4)血清RANTES水平和CRP (r=0.341,P<0.001)以及WBC总数(r=0.329,P<0.001)之间存在强烈的正相关,校正其他危险因素后,这种相关依然显著;(5)检测RANTES表达水平有望成为预测颅内外动脉粥样硬化以及全身血管病变的一种简便、可靠的检查手段。3. RANTES-403G/A和-28C/G基因型分布与颅内外动脉粥样硬化有相关性。采用焦磷酸测序法对颅内外动脉粥样硬化患者RANTES -403G/A和-28C/G基因多态性进行检测,经过统计分析,主要结果如下:(1)RANTES -403G/A和-28C/G两位点的基因型分布在颅内外动脉粥样硬化组和对照组均符合Hardy-Weinberg平衡定律;(2)RANTES -403G/A基因多态性可能与颅内外动脉粥样硬化易感性有关联,其突变等位基因A和血清RANTES表达水平增高相关,-403A等位基因是颅内外动脉粥样硬化疾病的危险因素;(3)RANTES-28C/G基因型分布与颅内外动脉粥样硬化的易感性有相关性,其突变的G等位基因和血清RANTES表达水平增高相关,-28G等位基因是颅内外动脉粥样硬化的危险因素;(4) -28G多出现在单倍体包含-403A的基因背景上,两者对颅内外动脉粥样硬化易感性的影响存在协同作用。4.通过CCR5受体拮抗剂阻断RANTES后,颈动脉粥样硬化发生受到影响。在本部分实验中,我们采用血管内皮细胞球囊损伤加高脂饲养法复制了兔颈动脉粥样硬化模型。在此基础,我们采用CCR5受体拮抗剂阻滞RANTES的作用,同时设置PBS阳性对照和正常组的阴性对照。主要结果如下:(1)血管内皮细胞球囊损伤加高脂饲养法能够成功复制出实验所需要的颈动脉粥样硬化动物模型;(2)CCR5受体拮抗剂能够阻滞RANTES作用,延缓颈动脉粥样硬化进程;(3) CCR5拮抗剂对动脉粥样硬化的治疗作用可能是通过包括RANTES在内的多种致炎因子共同参与实现的。