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目的在不同病程的迷走神经离断大鼠中,观察胃动力及胃组织肠胶质细胞的改变。方法将30只雄性Sprague Dawley(SD)随机分为正常对照组(control group,N=10),早期迷走神经离断组(early subdiaphragmantic vagotomy,ESDV,7 天,N=10),晚期迷走神经离断组(terminal subdiaphragmatic vagotomy,TSDV,56 天,N=10)。运用酚红试餐检测各组大鼠胃排空以评估胃动力的改变;利用RT-PCR、免疫荧光、透射电镜等技术测定胃组织肠胶质细胞中特异性表达物质GFAP和S100B基因及蛋白的水平和肠胶质细胞超微结构的变化。结果(1)与对照组相比,ESDV组胃排空加快但无统计学意义;TSDV组胃排空比ESDV组明显延迟。(2)与对照组和ESDV组相比,TSDV组GFAPmRNA表达量明显下降:与ESDV组相比,TSDV组中S100BmRNA表达量明显降低,但对照组和ESDV组中S100BmRNA表达量无明显差异。(3)与ESDV组和对照组相比,GFAP与S100B蛋白表达量在TSDV组中显著降低,但在ESDV与对照组中表达量未见明显改变。(4)在ESDV组和TSDV组中,肠胶质细胞超微结构受损,表现为线粒体肿胀和内质网扩张,中间丝数量减少。结论在迷走神经离断大鼠中,出现胃排空延迟,并且肠胶质细胞的结构和功能受损;同时肠胶质细胞具有一定代偿能力。目的探索在迷走神经离断时大鼠胃组织中GDNF及其下游信号通路PI3K/Akt的改变。方法建立迷走神经离断大鼠模型。应用Western blot检测胃组织GDNF、Cx43、p-Akt、pan-Akt和 PGP9.5 蛋白表达;应用 RT-PCR检测 GDNF、Cx43、pan-Akt和 PGP9.5 mRNA表达;应用免疫荧光方法检测GDNF与GFAP的定位和蛋白表达;应用TUNEL检测胃组织内细胞凋亡。结果(1)与对照组比较,GDNF、Cx43、PGP9.5相对蛋白表达量在早期迷走神经离断组明显下降;p-Akt和pan-Akt蛋白表达量在各组未见明显差异。(2)与对照组相比,GDNF、Cx43、PGP9.5 mRNA相对表达量在早期和晚期迷走神经离断组均明显降低;pan-Akt mRNA表达量在早期和晚期迷走神经离断组均比在对照组增加。(3)GDNF和GFAP表达在EGC上;与对照组相比,GDNF、GFAP和PGP9.5蛋白表达量在早期和晚期迷走神经离断组明显下降。(4)对照组中出现较少TUNEL(+)细胞,而在早期和晚期迷走神经离断组中,TUNEL(+)细胞数目明显增加。结论在迷走神经离断时,GDNF及其下游PI3K/Akt信号通路的功能受损,胃组织中凋亡细胞数目明显增加。目的探索同步双脉冲胃电刺激能否改善迷走神经离断大鼠的胃动力异常及对胃组织内EGC的作用,并进一步探讨可能调控机制。方法雄性SD大鼠,共50只,分为5组,包括正常对照组(control,N=10),早期迷走神经离断组(ESDV,2周,N=10),早期迷走神经离断组+急性同步双脉冲胃电刺激(ESDV+SSGES,30min/天,2+2周,N=10),晚期迷走神经离断组(TSDV,4周,N=10),晚期迷走神经离断组+慢性同步双脉冲胃电刺激(TSDV+LSSGES,30 min/天,4+6周,N=10)。同步双脉冲胃电刺激由一个长脉冲(300 ms,4 mA)和五个短脉冲(0.33 ms,4 mA,100 Hz)组成。利用酚红试餐测量胃排空以评估各组大鼠胃动力的改变,采用Western blot和RT-PCR技术测量胃组织Cx43、GDNF、p-Akt、pan-Akt和PGP9.5的基因和蛋白表达,应用免疫荧光技术测量GDNF和GFAP、PGP9.5的定位和表达,应用透射电镜观察EGC超微结构的改变,应用TUNEL技术测定细胞凋亡。结果(1)与对照组相比,胃排空在早期迷走神经离断组加快,在晚期迷走神经离断组延迟,LSGES显著改善晚期迷走神经离断所致的胃排空延迟。(2)Western blot结果显示Cx43蛋白在早期和晚期迷走神经离断组表达均显著下降,但SSGES和LSGES明显增加其表达;与相应的对照组相比,SSGES和LSGES均明显增加GDNF的蛋白表达量,但LSGES效果优于SSGES;与晚期迷走神经离断组相比,LSGES显著增加p-Akt的蛋白表达量;各组pan-Akt表达量均未见明显差异;PGP9.5蛋白在早期迷走神经离断组表达量明显降低,但SSGES能增加其表达。(3)RT-PCR结果显示Cx43、GDNF和PGP9.5 mRNA表达量在早期和晚期迷走神经离断组均显著下降,但SSGES和LSGES均明显增加其表达。(4)免疫荧光结果显示GDNF在EGC内表达,且在早期和晚期迷走神经离断组表达量下降,而SSGES和LSGES在一定程度上增加其表达;PGP9.5表达量在早期和晚期迷走神经离断组明显下降,在SSGES组和LSGES组表达量均明显上升。(5)与对照组相比,迷走神经离断组有较多的TUNEL(+)细胞,而LSGES和SSGES均能明显减少TUNEL(+)细胞。(6)在对照组中EGC胞内含有丰富的线粒体、光面和粗面内质网、中间丝等细胞器或结构;在迷走神经离断组则出现肿胀的线粒体、扩张的内质网、数目减少的中间丝;SSGES和LSGES通过增加线粒体和中间丝数目及减少内质网肿胀等改善超微结构受损的EGC。结论同步双脉冲胃电刺激有效缓解迷走神经离断所致的胃排空延迟;同时改善迷走神经离断大鼠胃组织内受损EGC的结构和功能,并上调GDNF及其下游PI3K/Akt信号通路。