背景传统的卵巢早衰（Premature ovarian failure,POF）治疗方案主要包括激素替代,接受赠卵、自体卵巢组织或同卵双胎卵巢组织移植等。然而,这些治疗方案不能解决生育问题,仅能在一定程度上改善卵巢功能。随着再生医学的发展,干细胞已经应用于组织修复与再生。近年来,人脐带间充质干细胞（Human Umbilical Cord Mesenchymal Stem Cells,h UC-MSCs）的发现和研究为干细胞的应用开辟了新的领域。h UC-MSCs移植治疗有望成为治疗化疗致卵巢损伤的新方法。大豆异黄酮是研究最多的植物性雌激素,能降低更年期症状。大豆异黄酮可以调控卵巢原始卵泡的生长和早期发育,促进优势卵泡发育、促进卵母细胞成熟、抑制闭锁卵泡形成;对于青年期及围绝经期,可以延缓卵巢功能退化,延长生育年限。目的1.以化疗致小鼠POF模型研究h UC-MSCs联合大豆异黄酮对POF小鼠卵巢功能恢复的影响。2.通过转录组测序筛选出与卵巢功能恢复相关的基因,分析其在POF小鼠卵巢功能恢复过程中的作用。方法1.从人脐带中分离华通氏胶,通过组织块培养法分离培养h UC-MSCs,培养至第2代时,流式细胞术检测表面标志物CD73、CD90、CD105、CD34、CD45、CD11b、CD19和HLA-DR进行鉴定。2.以造模成功的POF小鼠为研究对象,给予h UC-MSCs、大豆异黄酮或二者联合治疗,分别于治疗后14天、21天、28天和60天时Elisa法检测小鼠血清激素（E2、AMH、FSH）,并通过组织些切片技术对治疗后POF小鼠卵巢进行组织形态学观察。3.取模型组小鼠卵巢及h UC-MSCs治疗1周和4周后的小鼠卵巢,提取总RNA,进行转录组测序,筛选治疗前后的显著差异基因及其参与的信号传导通路;以此分析h UC-MSCs治疗恢复POF小鼠卵巢功能的相关分子机制。结果1.从脐带组织中分离出h UC-MSCs,并成功进行培养。P2细胞以梭形为主,半透明状,轮廓清晰,折光性好。流式检测结果显示,h UC-MSCs阳性高表达CD73、CD90、CD105（＞99%）;低表达CD34/CD45/CD11b/CD19/HLA-DR（＜0.5%）;表明本实验得到了纯度较高的h UC-MSCs。2.h UC-MSCs、大豆异黄酮及其联合治疗后,h UC-MSCs治疗组和联合治疗组卵泡数量与模型组相比明显增多,但是大豆异黄酮治疗组卵泡数量增多不明显。Elisa结果显示,h UC-MSCs移植可以改善环磷酰胺（Cyclophosphamide,CTX）和白消安（Busulfan,BUS）损伤的卵巢内分泌功能,使血清E2、AMH水平升高,FSH降低;大豆异黄酮治疗也可以改善CTX联合BUS损伤的卵巢内分泌功能,降低血清FSH水平。3.转录组测序结果表明:在治疗1周,治疗组中共有290个基因的表达量发生了显著变化,包括147个上调基因及143个下调基因;在治疗4周,治疗组中共有343个基因的表达量发生了显著变化,包括156个上调基因及187个下调基因。GO富集分析结果显示,治疗1周时这些差异基因主要参与环氧合酶途径、免疫系统过程等;治疗4周时这些差异基因主要参与炎症反应、免疫反应等。KEGG富集分析结果显示,治疗4周时差异表达基因主要参与异体移植排斥、自身免疫、血管内皮生长因子等信号通路;治疗4周时这异基因主要参与系统性红斑狼疮、Th1、Th2、Th17细胞分化等信号通路。结论1.大豆异黄酮单独使用对POF小鼠卵巢功能恢复无显著效果。2.h UC-MSCs及h UC-MSCs联合大豆异黄酮治疗能显著恢复POF小鼠卵巢功能。3.h UC-MSCs治疗可能通过调控PKHD1L1、CFHR2、GPR75、STOX1、USP49、ADAMTS-1、BRMS1、ALDH1A2、ACAP1、IL33、PTGS1等基因表达改善POF小鼠内分泌功能及卵巢功能恢复。