肝脾肾同治法对2型糖尿病大鼠糖脂代谢和对骨骼肌PI-3K通路的影响

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“五脏皆柔弱者,善病消瘅。”强调指出了五脏虚弱在糖尿病的发病意义。导师高思华教授据多年临床实践经验,提出的肝脾肾同治的辨证思路,认为:2型糖尿病的病机特点是肝脾肾三脏同病,无论何种原因先伤于肝、脾、肾任何一脏,最后均是渐次波及其他两脏,导致三脏同病,正虚与气滞、湿浊、血瘀、内热互见而发为糖尿病;治疗应从协调肝脾肾三脏关系入手,分清主次而三脏同治。在该理论基础的指导下,导师立足肝脾肾三脏同调辨证治疗糖尿病的脏腑辨证新模式,而形成了三个有代表性的有效方剂。降糖消渴1号方:以益肾平肝为主,健脾为辅,气阴两补佐以清热祛湿活血。降糖消渴2号方:以疏肝为主,健脾益肾为辅,气阴两补佐以清热祛湿活血。降糖消渴3号方:以健脾为主,疏肝益肾为辅,气阴两补佐以祛湿活血。为了研究肝脾肾同治法治疗2型糖尿病的有效性及其降糖机制,我们做了以下实验进行验证:1利用喂饲高脂饲料联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)的方法建立2型糖尿病大鼠模型,通过测量血糖、糖化血红蛋白、血脂、胰岛素和胰岛素敏感性指数(ISI)来观察降糖1号方与降糖2号方对实验性糖尿病大鼠的治疗效果。结果显示:给药4W后,与正常对照组相比,降糖1号、2号方均能显著降低大鼠血清血糖和TG的量,表明两方具有较好的降糖、降血脂作用,改善了糖脂代谢紊乱,对2型糖尿病的治疗和并发症的预防有积极地意义。同时发现,降糖方药干预4周后,大鼠的血糖血脂虽降低,但胰岛素水平没有提高,推测其作用机制是提高糖尿病大鼠对胰岛素的敏感性,改善大鼠的胰岛素抵抗状态。2选用降糖1号方大鼠含药血清来干预C2C12骨骼肌细胞,C2C12骨骼肌细胞分化成熟后,以棕榈酸,小牛血清白蛋白的DMEM干预,建立IR造模。并分为正常对照组、IR模型组、降糖方高、中、低剂量组和阳性药二甲双胍组,每组8复孔,药物干预24h后,取上清用以测定炎症因子,刮取细胞,用于RNA检测。结果显示,IR模型较正常细胞PI-3K p85, AKT,GLUT4,IRS-1mRNA,GSK表达量均下调,含药血清刺激24h后,C2C12细胞PI-3K p85,AKT,GLUT4,IRS-1mRNA,GSK表达明显增加。结果表明,含药血清刺激C2C12细胞可上调PI-3K p85,AKT,GLUT4,IRS-1基因,说明含药血清可能通过调节PI3K/AKT信号通路,进而影响GLUT4与IRS-1基因水平从而改善胰岛素抵抗。
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