滤泡性辅助性T细胞、IL-21及B细胞对HaCaT细胞增殖及细胞周期的影响

来源 :北京协和医学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zql0913
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目的:探究寻常型银屑病患者的外周血滤泡性辅助性T细胞及其主要功能性细胞因子IL-21、以及B淋巴细胞在体外培养条件下对HaCaT细胞增殖及细胞周期的影响。通过Tfh细胞、B淋巴细胞分别与HaCaT细胞体外共培养以及加入或阻断IL-21来验证Tfh细胞是否通过分泌IL-21作用于角质形成细胞导致其过度增殖、活化,介导银屑病的发生发展,探究Tfh细胞、IL-21以及B淋巴细胞在银屑病发病机制中可能的作用。方法:银屑病组包括15位寻常型银屑病患者,同时纳入10位健康对照者作为对照组。采集PASI评分、DLQI评分等临床信息,运用流式细胞技术分选出银屑病患者及健康对照者外周血CD4+CXCR5+的Tfh细胞以及CD19+B淋巴细胞,分别与HaCaT细胞以1:1进行共培养,同时Tfh细胞共培养组分别加入IL-21或IL-21中和抗体,培养72小时后收集细胞。通过CCK-8法检测细胞增殖活性、流式细胞学检测HaCaT细胞周期及其Ki-67表达情况,观察Tfh细胞、IL-21及B淋巴细胞对角质形成细胞增殖活化的影响。结果:将HaCaT细胞与IL-21体外共培养,结果显示IL-21对HaCaT细胞的增殖有促进作用(P<0.05),并可促使G0/G1期的HaCaT细胞进入S期(P<0.05)。对于B细胞与HaCaT细胞共培养组,银屑病组及健康对照组中HaCaT细胞在450nm处的吸光度值均升高(P<0.05),但银屑病组的促进作用更强(P<0.0001),且银屑病组S期细胞比例增多、G0/G1期细胞比例下降、增殖指数PI升高(P<0.05),健康对照组则无此调节细胞周期的能力。在Tfh细胞与HaCaT细胞共培养时,银屑病组与健康对照组均较空白对照组中HaCaT细胞增殖活性明显升高(P<0.0001),银屑病组较健康对照组促进作用更强(P<0.05);加入IL-21均比加入IL-21中和抗体组的HaCaT细胞增殖活性高(P<0.05);在银屑病组中,IL-21中和抗体组与Tfh+HaCaT单纯共培养组比较,可将HaCaT细胞阻滞于G0/G1期,减少S期细胞数量,进而抑制HaCaT 细胞增殖(P<0.05)。结论:1.银屑病患者生活质量与皮损面积及严重程度呈正相关;2.IL-21有可能通过促进角质形成细胞增殖而促进银屑病的发病;3.银屑病组较健康对照组B细胞在体外促进角质形成细胞增殖的能力更强。4.Tfh细胞可促进角质形成细胞增殖,且阻断IL-21可抑制这种促进作用;
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