血液是一种营养价值很高的动物性蛋白资源,可广泛应用于食品工业中,来源十分丰富。血红素是一类重要的天然卟啉铁化合物,是血红蛋白、肌红蛋白和红细胞的辅基(活性部位),是动物血液中的天然色素,具有重要的生理功能和使用价值。在血红素的测定方法研究中,分光光度法是血红素定量分析的传统方法,操作简单快速,成本低,适用于大批量样品的测定。HPLC法分离效果好,可联用其他仪器方法如质谱法对物质进行检测。但由于该方面的研究比较少,方法存在一定缺陷。以经过预处理的血红蛋白粉为原料,选用不同的蛋白酶分别进行单一酶和复合酶水解血红蛋白。结果表明碱性蛋白酶水解的效果最好。单因素实验和正交优化实验确定最佳水解条件为:温度60℃,pH值7.5,底物浓度5%,酶底比4%。此外,不同原料处理方式和复合酶水解对酶反应没有起到十分明显的作用。采用离心的分离方法从血红蛋白水解液中提取血红素。水解液在30℃保温,离心除去不溶性肽后,调节pH值4.0,再离心得产品。产品纯度最低为24.47%,得率为57.50%;与超滤分离所得产品(血红素含量9.02%)比较,离心分离的效果好于超滤分离。产品的性质研究表明:产品2为无定形粉末状,产品1呈黑褐色块状;每克产品1中含有血红素0.1781g,每克产品2中含有血红素0.2447g。紫外扫描图谱和凝胶色谱图表明,水解液中含有肽和血红素,其中肽占主要部分;上清液中只有肽,血红素已经被除去。产品2中血红素含量较高。液质联用可得产品2中主要物质的分子量为616.7和657,认为是血红素和为氯化血红素单体。二者占产品总血红素含量的70%。