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目的:采用响应面法分离纯化黑果枸杞总黄酮,建立HLP模型考察其降脂活性并初步研究黑果枸杞总黄酮体外对肝癌的抑制作用。方法:1)通过静态和动态吸附试验,分别以上样浓度、上样体积、上样pH、洗脱液浓度、洗脱液体积和洗脱流速为考察因素,黑果枸杞总黄酮纯化后含量为考察指标进行单因素考察,在此基础上选择三因素三水平Box-Behnken实验设计筛选黑果枸杞总黄酮纯化工艺参数并进行验证。2)将90只SD大鼠采用高脂饲料灌饲方式建立SD大鼠HLP模型。选取造模成功的SD大鼠60只,随机分为6组（n=10）,分别为正常对照组、HLP模型组、辛伐他汀组（3.3 mg/kg）以及黑果枸杞总黄酮提取物高剂量组（100 mg/kg）、中剂量组（50 mg/kg）和低剂量组（25 mg/kg）。连续灌胃给药4周,正常组喂养普通大鼠饲料,其余组喂养高脂饲料,给药结束后,采用酶标仪检测血清和肝组织液中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白（HDL-C）和低密度脂蛋白（LDL-C）的浓度,血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）的浓度、分析SD大鼠试验前后的体重变化率和肝指数变化并观察SD大鼠肝脏病变情况。3)采用MTT法检测不同浓度黑果枸杞总黄酮纯化物对正常肝细胞LO-2的存活率和对人肝癌细胞HepG-2的抑制率来确定最佳给药时间和浓度,用已确定的三种浓度总黄酮纯化物（25、50和100μg/mL）和20μg/mL顺铂给药48 h,再利用流式细胞仪检测细胞凋亡和周期的变化情况以及用ELISA法检测细胞凋亡相关酶的活性。结果:1)在总黄酮提取液浓度4 mg/mL、pH4.0、按5 BV进行上样,再用3 VB的80%乙醇在2 mL/min流速下采用NKA-9型大孔树脂进行洗脱,黑果枸杞总黄酮含量为43.19%。2)与HLP模型组相比,黑果枸杞总黄酮提取物高、中剂量组SD大鼠的血清和肝组织中TG、TC和LDL-C值明显降低,HDL-C值则升高,差异有统计学意义（P<0.01）;与HLP模型组比较,黑果枸杞总黄酮提取物高、中剂量组中SD大鼠体重增重率和肝指数显著降低,差异有统计学意义（P<0.05）;与HLP模型组比较,SD大鼠各剂量组血清中SOD和GSH-Px的浓度均有升高,MDA浓度则降低,差异有统计学意义（P<0.01）。3)MTT结果显示,随着给药时间的推移和浓度的增高,正常肝细胞LO-2的存活率逐渐降低。在低浓度（Con.≤100μg/mL）时药物对LO-2细胞毒性很少,细胞存活较完整;HepG-2肝癌细胞的抑制率随着给药时间和浓度的增加而增高。在高浓度时,HepG-2细胞出现大规模变形和凋亡。随着药物浓度的提高,HepG-2细胞周期中G0/G1期细胞比例逐渐降低,S期中则依次增高,HepG-2细胞凋亡率也增大,最高凋亡率可高达78.8%,与凋亡相关的Bax和Caspase-3酶活性升高,Bcl-2酶活性则降低。结论:1)通过响应面法考察出来的黑果枸杞总黄酮纯化工艺参数准确、可靠,此工艺制备得到的3批样品,含量基本稳定,平均值为43.19%,RSD值为1.12%,适用于工业化生产。2)黑果枸杞总黄酮提取物能有效调节机体脂质代谢及提高机体抗氧化能力,对预防并治疗高脂血症有一定的应用价值。3)黑果枸杞总黄酮纯化物对HepG-2肝癌细胞的增殖有抑制作用,抑制率可高达98.27%。同时可能通过上调Bax和Caspase-3酶活性,下调Bcl-2酶活性来诱导HepG-2肝癌细胞的凋亡。黑果枸杞总黄酮纯化物诱导HepG-2肝癌细胞周期阻滞于S期,进而使细胞停止分裂。