小檗胺对Jurkat细胞β-catenin信号通路的研究

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目的:研究生物碱小檗胺对人急性淋巴细胞白血病细胞Jurkat细胞增殖抑制、凋亡及β-catenin的影响。方法:采用MTT法测定不同浓度小檗胺作用Jurkat细胞增殖抑制率,并计算IC50值。采用流式细胞术检测经小檗胺作用后Jurkat细胞的凋亡率。免疫印迹法分析小檗胺作用细胞前后β-catenin表达量的变化,及免疫荧光检测药物作用前后β-catenin在细胞定位的变化。结果:1.小檗胺抑制Jurkat细胞增殖在一定范围内呈浓度—时间依赖性,24h、48h、72h的IC50值分别为20.75μg/ml、10.32μg/ml、6.75μg/ml。2.流式细胞术检测Jurkat细胞经小檗胺作用3h、12h、24h的凋亡率分别为7.1%、23.4%、66.8%,凋亡细胞百分比的增加与小檗胺的作用时间明显正相关。3.免疫印迹提示小檗胺作用Jurkat细胞后β-catenin表达下调。4.免疫荧光提示经小檗胺作用后β-catenin向Jurkat细胞核内转移减弱。结论:1)小檗胺能够抑制Jurkat细胞的增殖并诱导其凋亡,在一定药物浓度范围内其增殖抑制作用及诱导凋亡作用呈浓度-时间依赖性。2)小檗胺诱导Jurkat细胞凋亡可能是通过下调β-catenin蛋白的表达来实现。3)小檗胺可能通过抑制Jurkat细胞内β-catenin的核转位来诱导其凋亡。
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