白及多糖基水凝胶的制备、性能研究及在创面修复中的应用

来源 :天津中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bbandd
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外伤是临床常见的外科问题。急性创伤如烧伤、撕裂、挫伤等通常引起疼痛并伴随固有保护功能的丧失,慢性创伤如糖尿病溃疡则会导致伤口感染、坏死以及瘢痕生成,严重影响患者健康及生活质量。外伤的临床处理要求包括有效止血、伤口闭合、防止感染等,目前临床中常用敷料如纱布、绷带等无法满足要求,因此探索和开发新型多功能生物材料系统具有一定必要性和迫切性。近年来,水凝胶敷料在组织工程和再生医学领域受到广泛的关注,水凝胶满足“湿性愈合”的要求,可以模拟软组织和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)成分发挥填充、黏附、止血和促进创面愈合等作用。本文对中药白及的有效成分白及多糖进行改性修饰,白及多糖在高碘酸钠作用下生成双醛基白及多糖(Dialdehyde Bletilla striata polysaccharide,BSP-CHO),不同醛基含量的BSP-CHO相对分子质量出现下降趋势,但是其体外抗氧化活性并未丧失。通过乙二胺接枝明胶获得阳离子明胶(Cationic gelatin,CG),有效增加活性氨基基团含量。两种材料基于席夫碱反应得到具有自愈活性的可注射白及多糖-明胶水凝胶(BG-gel 1,2,3),相较于合成高分子材料,白及多糖和明胶均具有良好的生物相容性,席夫碱反应也没有引入任何化学交联剂,因此BG-gel水凝胶具有良好的细胞相容性、血液相容性及体内安全性,可以在大鼠皮下稳定降解;BSP-CHO中醛基含量的提高使水凝胶交联密度呈现增加趋势,表现为孔洞直径减小、力学性能的加强以及坍塌点的后移;体内外实验表明BG-gel水凝胶可以促进L929细胞迁移融合,并减少大鼠肝脏穿刺和小鼠断尾出血模型的流血时间,具备优异的止血性能。通过大鼠全层皮肤缺损模型验证BGgel系列水凝胶的创面愈合功能,BG-gel系列水凝胶可以吸收创面渗出液,促进创面输送营养物质和废物的吸收和代谢,有效促进创面初期止血,减少创面炎症反应,加速创面上皮化,有助于创面愈合。伤口愈合组织切片的H&E染色结果可知BG-gel系列水凝胶增加血管生成、促进毛囊发育。Masson染色表明BG-gel系列水凝胶可以促进胶原纤维和新表皮层形成,增加创面区域胶原蛋白表达。通过反相微乳法制备包载盐酸小檗碱和铜肽(glycyl-L-histidyl-L-lysine-Cu,GHKCu)的海藻酸锌纳米粒,将两种载药纳米粒分别嵌入水凝胶共混制备载盐酸小檗碱纳米粒复合水凝胶(BNPs-gel)和载GHK-Cu纳米粒复合水凝胶(GNPs-gel),复合水凝胶中两种药物均表现为“缓释”行为,载药纳米粒的加入提高水凝胶的力学性能;大鼠全层皮肤缺损模型研究BNPs-gel和GNPs-gel对创面愈合的综合促进作用。其中,BNPs-gel在创面愈合初期发挥明显的抑菌作用,并减少了相关炎症因子m RNA表达,加速创面由炎症期向增殖期转变;GNPs-gel可以有效促进相关生长因子m RNA表达,促进新生血管生成。免疫组化实验结果表明两种复合水凝胶有效促进细胞增殖抗原Ki67表达,GNPs-gel还能促进血管生成因子CD31表达。本文对中药有效成分白及多糖和天然生物材料明胶进行改性修饰处理,使其成为制备水凝胶的基质材料,其中白及多糖发挥“药辅双效”的作用,既作为基质参与水凝胶的构建,又表现出良好的促进愈合功能。在此基础上,将载药纳米粒嵌入到白及多糖基水凝胶中搭建一种多功能混合生物材料系统以达到药物持续和控制的释放的目的,提高药物在创伤组织局部的生物利用度,促进伤口的愈合。载药纳米粒-水凝胶混合生物材料是一种制备创面敷料的可行方法,药物在水凝胶中持续和控制地释放有效增加其生物利用度,载药纳米粒还在一定程度上赋予水凝胶抗炎、促进伤口愈合及促进血管新生等药理性能作用,在修复伤口加速创面愈合方面具有很大的应用潜力。
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