【摘 要】
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用酶或细胞生物转化一些特殊产物是酶工程领域的支撑点。然而,酶常以可溶性形式存在,难于从反应混合物中再分离,往往随转化过程的完成而一并弃之。酶是一种比较昂贵的产品,因此,如何能使酶反复利用,提高效率,降低成本,就成为酶工程领域的技术瓶颈。用某些不溶性支撑物将酶或细胞固定化可解决上述技术难关,有关这方面内容已有详尽报道。 海因酶（Hydantoinase, EC 3.5.2）,是一类催化海因、5
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用酶或细胞生物转化一些特殊产物是酶工程领域的支撑点。然而,酶常以可溶性形式存在,难于从反应混合物中再分离,往往随转化过程的完成而一并弃之。酶是一种比较昂贵的产品,因此,如何能使酶反复利用,提高效率,降低成本,就成为酶工程领域的技术瓶颈。用某些不溶性支撑物将酶或细胞固定化可解决上述技术难关,有关这方面内容已有详尽报道。 海因酶（Hydantoinase, EC 3.5.2）,是一类催化海因、5’-单替代海因及其衍生物环酰胺键断裂的酰胺水解酶。具有光学活性的D-氨基酸作为一种中间体被广泛应用于半合成抗生素、多肽激素、拟除虫菊脂、杀虫剂等的合成。D-型氨基酸可由5’单替代海因经D-海因酶和N-氨甲酰-D-氨基酸酰胺水解酶两步反应合成。目前,利用基因工程菌生物转化D-型氨基酸已成为世界氨基酸产业的新潮流。 本实验对使用固定化产海因酶工程菌转化N-氨甲酰-D-对羟基苯甘氨酸进行了研究。以2.5%海藻酸钠5 g与30 ml工程细胞均匀混合,滴入5%的CaCl2溶液中,4℃硬化5 hrs,制成固定化细胞。固定化细胞催化底物对羟基苯海因的酶活力相当于游离细胞的2倍。对游离细胞和固定化细胞的最适pH值,热稳定性,以及二价金属离子的影响等进行了比较。重复转化实验表明,固定化细胞的半衰期约为32天。使用固定化产海因酶工程菌转化N-氨甲酰-D-对羟基苯甘氨酸,高效液相色谱定量分析产物,结果表明,固定化细胞与底物反应的转化产物,在4 hrs内,转化率约为80%。 Eupergit-C是目前共价结合法固定化酶使用的一种新型载体,属于弱阳离子交换树脂,其活性基团为环氧乙烷。本实验首先对本室构建的产海因酶工程菌株发酵所得酶液,经（NH4）2SO4分级沉淀、Phenyl Sepharose疏水层析等步骤进行纯化,得到D-海因酶纯制剂。其比活为8 U/mg,活
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本文首先简单介绍了广义自回归模型,接下来给出了相关的主要结论。重点是第三章和第四章,分别是主要结论的证明和应用。本文给出的主要结论是将广义自回归模型的设计矩阵 Pn=sum from k=1 to n （XkX′k）, X′k=（X（k）,…,X（k-p+1））分解成对角矩阵,对角元分别为平稳的,振荡的和爆炸的自回归子模型,即存在一个非奇异的实矩阵R,使得 RPnR′=（1+o（1））
本试验对日本龟蜡蚧（Ceroplastes japonicus Green）、角蜡蚧（Ceroplastes ceriferus Fabricus）、白蜡绵粉蚧（Phenacoccus fraxinus Tang）、瘤大球坚蚧（Eulecanium gigantea Shinji）和朝鲜球蚧（Didesmococcus koreanus Borchsenius）等5种蚧虫基因组DNA的提取和微卫星
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