胆囊切除术后肠道菌群改变与结直肠癌的关系

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhangg91
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目的:结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是发病及死亡率均呈持续上升态势的恶性消化道肿瘤之一。研究认为多因素参与了CRC的发生发展,近年来研究发现胆囊切除术可导致肠道微生物失调,继而胆酸代谢障碍,使患者处于结直肠癌的高危状态,然而究其肠道菌群特征变化是否因胆囊切除术后改变知之甚少。鉴于此,本研究采用高通量测序技术,探寻胆囊切除术后患者肠道菌群的一些改变在多样性、分布及相对丰度的方面,目的研究结直肠癌发病原因是否涵盖胆囊切除术后影响菌群变化这一方面。方法:选取在山西省人民医院就诊的,位于2018年3月至2019年9月时间段内,并符合要求的入组人员20例,其中健康志愿者4例、LC术后患者5例、结直肠癌患者6例、LC术后结直肠癌患者5例,并采集相应粪便标本20例,对采集的粪便样本分组(A、B、C、D组)。再对样本相关细菌进行DNA提取与检测,PCR扩增、产物纯化等相关操作,再通过生物信息学分析获得特定实验样品中细菌物种组成、复杂性及分布变化等诸多信息。结果:实验共得到了835502条高质量扩增特征序列(即OTU),后按99%序列相似性聚类,为获得物种注释信息对比核糖体RNA数据库。统计分析每个样品在分类水平(界门纲目科属种)上的序列数目与总序列数相比。Alpha多样性稀释曲线趋于平缓,基本覆盖了99.9%的细菌物种。Shnnon指数反应菌群多样性,在各组间无明显差异(P>0.05),chao1指数反映物种丰富度的指标,各组间无明显差异(P>0.05)。在门水平上,优势菌在A、B、C、D四组间十分相似,类如:壁厚菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobactenia),几乎占据了肠道菌群的90%以上。其中在肿瘤组中Verrucomicrobia的菌群丰度比健康组明显增加,且差异具有统计学意义(P<0.05);TM7的菌群相对丰度在B组比A组增高,差异存在统计学意义(P<0.05);D组的Fusobacteria菌群相对丰度比B组的减少,且差异具有统计学意义(P<0.05);而D组的Actinobacteria比C组的Actinobacteria的菌群相对丰度高,存在统计学意义(P<0.05);C组的Synergistetes菌群比其余各组菌群的相对丰度高,差异具有统计学意义(P<0.05)。在属的水平上,消化链球菌属(Peptostreptococcaceae)、普雷沃菌属(Paraprevotellaceae)、疣微菌门(Verrucomicrobia)、普氏菌属(Prevotella)、颤螺菌(Oscillospira)在肿瘤组(C+D组)的菌群的相对丰度比健康组(A+B组)增高显著,有统计学意义(P<0.05);梭杆菌(Fusobacteria)菌群的相对丰度在B组、C组均比A组的增高显著,有统计学意义(P<0.05);巨单胞菌属(Megamonas)、普雷沃菌属(Paraprevotellaceae)、普氏菌属(Prevotella)、TG5、月形单胞菌属(Selenomonas)在D组比C组菌群的相对丰度明显增加,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:1与健康人相比肠道菌群微生态在结直肠癌患者中发生了显著改变。2胆囊切除术后患者的肠道菌群多样性与健康人比未见明显差异。3梭杆菌在胆囊切除术后患者的肠道中相对丰度显著增加,可能引起肠道炎症,促进条件致病菌的生长,促进结直肠癌的发生发展。4胆囊切除术所致肠道微生态的改变可能在结直肠癌的发生及癌症进展中影响甚大。
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