基于固定化酶-MWNT修饰铂电极检测黄曲霉毒素传感器的研制及其条件优化

来源 :暨南大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:liongliong589
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
黄曲霉毒素(AFB1)是一种强致癌致畸的真菌毒素。目前国内外已有多种AFB1的检测方法的报道。其中基于黄曲霉毒素解毒酶(ADTZ)对黄曲霉毒素B1和黄曲霉毒素B1结构类似物杂色曲霉素(ST)的酶生物传感器检测,是本研究所新近报告的方法。本研究的目的是针对组装的酶生物传感器检测AFB1、ST尚未进行的稳定性、使用寿命连续检测特性,以及提高检测灵敏度等开展研究,探索可用于多次使用并能用于连续分析AFB1的酶生物传感器的构建方法。方法:制备高纯度和高比活的rADTZ,作为传感器的识别元件。组装和比较三种不同方式的传感器:①rADTZ/EDC&NHS/MWNT电极(共价交联固定rADTZ于MWNT修饰电极)②rADTZ&sol-gel电极(sol-gel溶胶凝胶包埋rADTZ直接固定于铂电极表面)③rADTZ&sol-gel/MWNT电极(sol-gel溶胶凝胶包埋rADTZ固定于MWNT修饰电极)用循环伏安法(CV),微分脉冲伏安法(DPV)和计时电流分析法(TB),表征修饰电极的检测性能及检测条件优化。结果:1.常压蛋白纯化系统两步法纯化出来的rADTZ酶活为95.8U/g,纯度达到76.10%,为制备酶修饰电极提供必要的实验材料。2.rADTZ&sol-gel/MWNT修饰电极具有良好的抗甲醇干扰能力。良好的重复性和稳定性,4℃保存28天后,峰电流差值标准偏差为2.1%。3.计时电流分析实验结果表明,此酶修饰电极具有较为快速的响应,平均响应时间为44s,当CAFB1大于45μg/L以上时,电流响应时间小于30s。并且能连续稳定检测5小时以上。对AFB1的检测线性范围为:5×10-6g/L~2.5×10-5g/L,3×10-5g/L~7×10-5g/L,表明rADTZ&sol-gel/MWNT修饰电极是一种理想的,且具有与流动注射FIA分析结合,进行AFB1在线动态检测的手段和方式。
其他文献
目的:通过建立新生Sprague-Dawley大鼠缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic-ischemic brain damage,HIBD)的动物模型,测定HIBD不同时间点脑组织中NLRP1、Caspase-1、IL-18的表达及给予静注人免疫球蛋白(IVIG)干预后对NLRP1-Caspase-1-IL-18通路表达的影响。方法:(1)选择7日龄清洁级SD大鼠96只,随机分成3组,Sham组,H
亚历山大藻属(Alexandrium)是一类重要的赤潮甲藻,广泛分布于世界各地,其属下约一半为有毒种类。该属最早依据形态分类法建立,但由于随后形态分类法的分类标准不断更新,使得该属的分类地位众说纷纭。微卫星标记是近年来发展迅速的分子生物学技术,在遗传多样性分析、遗传图谱的构建和群体遗传学研究等方面应用广泛。鉴于此,本研究采用生物信息学的方法,从塔玛亚历山大藻的表达序列标签(ESTs)数据库中筛选微
软骨藻酸(domoic acid,DA)是由海洋硅藻产生的一种兴奋性神经毒素,它可在鱼贝类中富集,且常常伴随着赤潮的发生,人类摄入后能够引起记忆缺失性中毒(amnesic shellfish poisoning,ASP),故又称记忆缺失性贝类毒素。鱼类可以通过摄食藻细胞或累积藻毒素的浮游动物在一些组织器官如肝脏、胃、鳃中富集DA。随着有毒藻类赤潮发生越来越频繁,DA不仅威胁着渔业和水产业,也危害着
目的:研究槲皮素(quercetin,Que)对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)大鼠肾组织中磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶α(Phosphorylationalpha-AMP-activated protein kinase,p-AMPKα)蛋白表达及TGF-β1/Smad3信号通路的影响,探究槲皮素在抗肾纤维化过程中可能存在的作用机制。方法:(1
目的:VPAC1受体是神经多肽PACAP与VIP的共同受体,介导多种重要的生物学功能。本文利用VPAC1受体特异激动剂,采用高脂高糖制备的肥胖小鼠模型,开展VPAC1受体参与小鼠能量代谢平衡调节的功能研究;并在细胞水平对VPAC1受体调节能量代谢的机制进行初步探索,最后利用基因工程原理和技术实现重组VPAC1特异激动剂的高效制备,为VPAC1受体及其激动剂的深入开发与应用奠定基础。方法:首先利用化
目的:建立胎牛肺间充质干细胞(Lung-derived mesenchymal stem cells,LMSCs)的体外培养体系、研究其生物学特性,探究胎牛肺间充质干细胞对脂多糖介导的小鼠急性肺损伤的治疗修复作用。方法:(1)LMSCs的分离及培养:以3-4个月龄流产胎牛牛肺为研究材料,采用胶原酶消化法及组织块贴壁法获得LMSCs,并进行传代培养。(2)LMSCs生物学特性研究:形态学观察,绘制细
背景:利用基因工程方法使用大肠杆菌合成人重组血红蛋白时,当中会出现一部分血红素插入不正确的重组血红蛋白。为了要研究如何提高正确重组血红蛋白的比例和减低不正确重组血红蛋白的比例。首先,我们必须要有一套能分析它们比例的良好的方法。 方法:在这研究中,我们将会探讨:(1)非变性凝胶电泳和(2)毛细管区带电泳(CZE)。样品的制备是利用带有PHE7质粒的大肠杆菌来合成人重组血红蛋白。然后,利用了两步
色谱法是近代发展起来的一种新型分析技术,在科学实验和国民经济各领域都有广泛应用。色谱模型的核心技术是非线性双曲守恒律初边值问题。由于这类问题的高度非线性以及所描述的物理现象的复杂性,因此这方面的研究是非常有意义的。本文围绕色谱的实际问题,建立双组分非线性色谱的数学模型,研究双组分色谱所对应的非线性双曲守恒律方程组的初边值问题。首先,通过适当的变换将双组分非线性色谱方程组纳入标准双曲守恒律框架,通过
量子代数是由生成元和关系式定义的代数。令R=Z[v]m,v是未定元,m是Z[v]的由v-1和固定奇素数p生成的理想。R′是R的分式域,U′是R′上相伴于R′的Caftan矩阵的量子代数,U是R上的量子代数,它是U′的R子代数。定义相应的余乘法,余单位,对极映射,则U′是R′-Hopf代数,U有继承的R-Hopf结构。在文献[1]中作者构造了量子代数U的量子坐标代数R[U]=Fδ(h(R))作为其对
本文主要研究润腔在民族声乐演唱中的运用研究,润腔是在中国民族声乐发展的历史长河中形成的一套对唱腔加以美化、润色、修饰的独特技法,也是中国民族声乐区别于其他声乐艺术的重要要素之一,更是中国民族声乐艺术美学价值的重要体现。润腔的使用,使民族声乐演唱变得更加丰富、华美、精致。本文从润腔的定义、起源与发展、形成原因、分类以及发展趋势等方面进行研究,全方位的剖析润腔的各个方面,充分的了解润腔,正确的对待润腔