【摘 要】
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溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）是一种发于结肠黏膜及黏膜下层的炎症性肠病,表现为肠道黏膜屏障破坏、免疫紊乱和肠道菌群失调等。目前治疗UC的临床药物主要有磺胺吡啶盐、5-氨基水杨酸、皮质类固醇和钙调磷酸酶抑制剂等,但长期使用会有严重的副作用。近年来,单独的益生菌、膳食纤维（Dietary fiber,DF）作为UC防治方法被广泛研究,但发现治疗效果缓慢,未能满足UC治疗的要
【基金项目】
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甘肃省农业生态环境保护专项新技术（新设备）研发推广项目（项目编号:RWS-NYSTZZ202104）； 甘肃省教育厅青年博士基金项目（项目编号:2021QB-065）； 中央高校基本科研业务费专项资金资助（项目编号:31920210054）；
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溃疡性结肠炎（Ulcerative colitis,UC）是一种发于结肠黏膜及黏膜下层的炎症性肠病,表现为肠道黏膜屏障破坏、免疫紊乱和肠道菌群失调等。目前治疗UC的临床药物主要有磺胺吡啶盐、5-氨基水杨酸、皮质类固醇和钙调磷酸酶抑制剂等,但长期使用会有严重的副作用。近年来,单独的益生菌、膳食纤维（Dietary fiber,DF）作为UC防治方法被广泛研究,但发现治疗效果缓慢,未能满足UC治疗的要求。本研究对枯草芽孢杆菌、动物双歧杆菌的培养条件进行了优化,结合实验室前期研究,将益生菌与白菜膳食纤维配置成复合制剂,开展了复合制剂对葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的小鼠急性UC的治疗作用。得到如下主要结果:1.枯草芽孢杆菌培养条件优化:以LB培养基为基础培养基,OD值和活菌数为评价指标。结果表明,枯草芽孢杆菌最佳培养条件为温度37℃、接种量5%、初始p H值7.0、转速为190 r/min、培养时间20 h,该菌在以大豆蛋白胨12 g/L、可溶性淀粉13 g/L、碳酸钙5 g/L为主要机制的培养条件下生长良好,活菌数达到了5.34×10~8 CFU/m L。2.动物双歧杆菌培养条件优化:以MRS培养基为基础培养基,OD值和活菌数为评价指标。结果表明,动物双歧杆菌最佳培养条件为温度33℃、接种量5%、初始p H值7.75、培养时间40 h,该菌在以氮源（蛋白胨∶牛肉膏∶酵母粉=2∶2∶1）29 g/L、葡萄糖22 g/L、乙酸钠6 g/L、柠檬酸三铵2 g/L、磷酸氢二钾2 g/L主要机制的培养条件下生长良好,活菌数达到了4.58×10~8CFU/m L。3.益生菌-膳食纤维复合制剂对急性UC干预效果的研究:用30%DSS对C57BL/6小鼠进行为期7 d灌胃实验,形成小鼠急性UC损伤模型。再用0.9%生理盐水（DSS模型组）,美沙拉嗪（PC组）,益生菌（YSJ组）,益生菌-膳食纤维复合制剂（FH组）进行7 d的灌胃干预,通过对小鼠病理指标、结肠组织学、炎性因子水平、氧化应激水平和肠道通透性进行检测,对比空白对照组（NC组）,评价FH对UC小鼠的影响。结果表明,FH组小鼠的体重增长、结肠长度、脾脏重量等方面都优于DSS模型组（P＜0.05）,DAI评分为1.14,明显低于DSS模型组2.46（P＜0.05）;与NC组相比,DSS模型组小鼠结肠黏膜组织破坏严重,结构消失,而FH组结肠组织仅部分受损,结构相对完整,组织学评分为3.38,明显低于DSS模型组8.23;与DSS模型组相比,各试验组小鼠血清中IL-6、TNF-α、INF-γ含量明显降低（P＜0.05）,IL-4、IL-10含量明显升高（P＜0.05）;与DSS模型组相比,FH组小鼠血清中MPO、MDA含量分别降低了0.72 U/g、11.78 mmol/ml（P＜0.05）,SOD、GSH的含量分别升高110.89U/g、209.58 mmol/ml（P＜0.05）;与NC组相比,DSS模型组小鼠结肠中紧密连接蛋白occludin、claudin-1和ZO-1的表达量明显降低（P＜0.05）,而FH组紧密连接蛋白表达量明显升高（P＜0.05）。综上所述,益生菌-膳食纤维复合制剂可以有效减轻炎症反应、抑制氧化应激、保护肠道屏障功能,对DSS诱导的小鼠急性UC症状缓解效果明显,为急性UC的治疗提供了实验依据。
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