本文从四种桑黄菌丝中筛选出白桦酯醇含量高的桑黄菌种为试材,分析硫化氢(H2S)和氯化钙(CaCl2)对桑黄菌丝体中白桦酯醇积累的影响,分析H2S对菌丝中不同形态钙含量及其合成关键酶的活性的影响,同时分析了H2S对桑黄菌丝体转录水平的影响,主要研究结果如下：一：H2S和CaCl2诱导桑黄菌丝体白桦酯醇积累的交互作用分析1.分别将终浓度为0.1mM、0.5mM、1mM、2mM、5mM、10mM、15mM、20mM、50mM的NaHS添加到液体培养的桑黄菌丝体体系中,发现低浓度的NaHS促进了白桦酯醇的合成,而高浓度的NaHS则为抑制作用,其中2mM NaHS促进效果最佳,与对照相比含量增加了90.95%。在第4、8、12天将2mM NaHS添到体系中处理12h、24h、48h、72h、96h,发现除了4d48h和8d12h白桦酯醇含量有所降低之外其余均有所升高,其中8d48h促进效果最佳,白桦酯醇含量增长率为112.43%。分别将终浓度为1mM、5mM、10mM、15mM、20mM、50mM的CaCl2加入到液体培养的桑黄菌丝体体系中,发现随着CaCl2浓度的提高白桦酯醇含量逐渐增加,当浓度上升到10mM时,促进效果最佳,白桦酯醇含量与对照相比增加了102.86%。随着浓度的继续增加白桦酯醇含量曾下降趋势。在第4、8、12天将10mM CaCl2添到体系中处理12h、24h、48h、72h、96h,发现均促进了白桦酯醇的合成,其中8d96h促进效果最佳,与对照相比白桦酯醇含量增加了99.83%。在最佳浓度2mM NaHS处理的基础上分别加入终浓度为1mM、5mM、10mM、15mM、20mM、50mM的CaCl2,发现白桦酯醇含量呈现先上升后下降的趋势,其中2mM NaHS和lOmM CaCl2共同处理促进效果最佳,白桦酯醇含量与对照相比增加了143.37%。将钙离子通道阻断剂加入到2mM NaHS处理的体系中,发现白桦酯醇含量与单独进行2mM NaHS处理时相比有所降低。综合上述结果,可以初步推断H2S和CaCl2互作提高了白桦酯醇含量。2.将终浓度分别为0.5mM、2mM、10mM,处理时间分别为3h、6h、9h、12h、18h、24h、48h的NaHS添加到液体培养的桑黄菌丝体体系中,发现几种形态钙含量和钙合成关键酶均有不同程度的变化,总体趋势表现为2mM>0.5mM>10mM,其中(2mM、48h)促进效果最佳。将钙离子通道阻断剂加入到2mM NaHS处理的体系中,发现形态钙含量和钙合成关键酶活性与单独进行2mM NaHS处理时相比均有所降低。综合上述结果,可以推断钙介导了H2S的促进作用。3.将终浓度分别为0.5mM、2mM、10mM,处理时间分别为3h、6h、9h、12h、18h、24h、48h的NaHS添加到液体培养的桑黄菌丝体体系中,发现可溶性蛋白含量变化趋势与钙合成关键酶活性变化基本一致,其中(2mM、48h)促进效果最佳,而(10mM、18h)抑制效果最显著；而超氧阴离子产生速率和总蛋白酶活性与之相反,其中(2mM、48h)抑制效果最佳,而(10mM、18h)促进效果最显著,说明(2mM、48h)的NaHS处理桑黄菌丝体的活性最佳。将钙离子通道阻断剂加入到2mM NaHS处理的体系中,发现可溶性蛋白含量与单独进行2mM NaHS处理时相比均有所降低,而另两者的变化则相反,说明钙介导了H2S对桑黄菌丝体活性的促进作用。由上可知,H2S和CaCl2互作提高了白桦酯醇含量,钙介导了H2S促进白桦酯醇合成的诱导作用。二：H2S对桑黄菌丝体转录水平的影响利用Illumina高通量测序技术对桑黄菌丝体进行了转录组测序、de novo组装,结果表明序列组装后得到25811条unigene,有19,266条被注释到NR数据库中,有86.2%的基因与地中海嗜蓝孢孔菌具有较高的同源性；有7831条基因被注释到COG数据库中,有6845条基因注释到GO库中,11088条基因注释到了108个代谢通路中；对对照(control)、3h的NaHS处理(H2S-3h).12h的NaHS处理(H2S-12h)、24h的NaHS处理(H2S-24h)这四个样品间进行数字基因表达谱分析,表明control-vs-H2S-3h中共有4836条unigene基因差异表达,control-vs-H2S-12h中共有4017条unigene基因差异表达,control-vs-H2S-24h中共有4222条unigene基因差异表达；GO分类结果与整个转录组的GO分类结果一致,它们主要被定位于细胞结构上、执行催化活性以及参与代谢过程；对其进行KEGG注释,分析萜类化合物的代谢途径,其中代表途径中硫解酶、甲羟基戊二酰-CoA合酶、甲羟基戊二酰-CoA还原酶、二磷酸甲羟戊酸脱羧酶、异戊二烯基二磷酸-δ异构酶、法尼基二磷酸合酶的基因大量上调表达。