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目的将趋化因子巨噬细胞炎症蛋白-1α(macrophage inflammation protein-1α, MIP-1α)在外周血快速动员的B220~-CD11c~+细胞,体外诱导分化为成熟树突状细胞(dendritic cells, DC)后,经基因转染制备表达肿瘤抗原的DC疫苗,研究其在荷瘤小鼠体内的抗胃癌免疫作用。方法(1)615小鼠通过尾静脉注射MIP-1α,分离外周血单个核细胞(mononuclear cells, MNCs),流式细胞仪分选出B220~-CD11c~+细胞,加入鼠粒-巨噬细胞集落刺激因子(mGM-CSF)、白介素-4 (IL-4)和鼠肿瘤坏死因子-α(mTNF-α)贯续培养进行诱导分化。(2)通过细胞形态学、表型和混合淋巴细胞反应,检测新鲜分离的B220~-CD11c~+细胞和经过细胞因子培养后的B220~-CD11c~+细胞的异同。(3)收集培养后的B220~-CD11c~+细胞,以感染复数(multiplicity of infection, MOI) 100加入编码黑色素瘤抗原基因-3 (melanoma antigen gene-3, MAGE-3)的重组腺病毒(Ad-MAGE-3)进行转染,制备表达肿瘤抗原的DC疫苗;同时以MIP-1α动员的B220~-CD11c~+细胞荷载小鼠前胃癌(mouse forestomach carcinima, MFC)全肿瘤细胞抗原制备的DC疫苗(MIP-1α-DC-MFC Ag)作为阳性对照。(4)将MFC细胞经皮下注射制备小鼠胃癌实体瘤模型,表达肿瘤抗原的DC疫苗分别于MFC细胞接种前后经皮下注射,观察小鼠瘤体生长和存活情况,研究DC疫苗的免疫保护及治疗作用。结果(1)MIP-1α注射615小鼠8小时后外周血中B220~-CD11c~+细胞数量即升高,48小时后逐渐达到高峰,占外周血MNCs 13.68%±0.95%。(2)新鲜分离的B220~-CD11c~+细胞不具有成熟DC的特征,而B220~-CD11c~+细胞在体外经过细胞因子培养诱导分化后则具有典型的DC形态和表型,并在混合淋巴细胞反应中具有极强的刺激T细胞增殖的能力。(3)MIP-1α动员的B220~-CD11c~+细胞,在诱导分化为成熟DC后,经Ad-MAGE-3转染制备表达肿瘤抗原的DC疫苗