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目的：将刀豆蛋白A与结核杆菌HSP65 DNA疫苗联合应用于Balb／c小鼠，期望通过提高APCs的抗原递呈能力达到增强结核杆菌HSP65 DNA疫苗所诱导的细胞免疫应答的目的。方法：在本实验中先用碱裂解法大量提取大肠杆菌中的重组pcHSP65质粒DNA，即结核杆菌HSP65 DNA疫苗，用0.01M PBS溶解并调整其浓度为1mg／ml，备用。将Balb／c小鼠随机分成4组：PBS对照组(A)；ConA组(B)；HSP65DNA疫苗组(C)；ConA+HSP65 DNA疫苗组(D)，A组只注射0.01M PBS，B组只注射一次ConA 500μg／只，后腿股四头肌注射，250μg／腿，C组后腿股四头肌注射HSP65DNA疫苗三次，100μL／次，50μl／腿，每次间隔两周，D组于第一次免疫的前两天，后腿股四头肌注射ConA 500μg／只，250μg／腿，再用DNA疫苗免疫三次，每次间隔两周。于初次免疫的4、6、8、10周摘小鼠眼球取血，收集血清，将血清进行不同浓度稀释后用间接ELISA方法检测各组小鼠的抗体水平；第8周取脾脏用Trizol一步法提取总RNA，然后用RT—PCR试剂盒检测各组IL-4和IFN-γ的mRNA表达情况；取腹腔MΦ进行细胞培养数小时后收集上清用试剂盒检测NO含量。结果：D组的抗体水平始终较C组低：C组在4、6、8、10周1：100稀释时的吸光度分别为：1.06、1.40、1.83、1.63；D组在4、6、8、10周时的吸光度分别为：0.93、1.24、1.71、1.59；第8周将血清进行1：100、1：200、1：400、1：800、1：1600、1：3200稀释时C组的吸光度分别为1.83、1.48、1.08、0.67、0.39、0.27；D组的吸光度分别为1.73、1.36、0.93、0.58、0.30、0.23；第8周时C、D组抗体的绝对含量分别为729.38mg／L、672.55mg／L。四组小鼠均可检测到IFN-γ的mRNA的表达，以GAPDH为内参照，IFN-γ的mRNA的表达量最高(A、B、C、D组分别为0.26、0.44、0.51、0.89)，四组小鼠均可检测到IL-4 mRNA的表达，A组表达量最高(A、B、C、D组分别为0.85、0.70、0.62、0.10)，D组IL-4 mRNA及IFN-γ mRNA的表达量与其它三组相比，均有显着性差异(P＜0.01)；D组腹腔MΦ的NO水平最高，(A、B、C、D组浓度分别323.42μmol／L、448.20μmol／L、439.03μmol／L、515.43μmol／L)且明显高于B、C组 (P(0 .05 vsB、C)。结论:Co叭与结核杆菌HSP65 DNA疫苗联合应用对机体体液免疫应答以及IL一4 mRNA的表达有一定的抑制作用，而对IFN一Y mRNA的表达有促进作用，且还提高了腹腔M中中NO的含量，由此推断ConA与结核杆菌HSP65DNA疫苗联合应用促进了Tho向Thl转化，抑制了ThZ体液免疫应答，增强了Thl细胞免疫应答。这也间接证明ConA与结核杆菌HSP65 DNA疫苗联合应用可能增强APCs的抗原递呈功能的设想。