【摘 要】
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目的:肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,死亡率在各类恶性肿瘤排名第一,2018年11月发表在CA杂志上的结果显示肺癌仍然是全球最常见的恶性肿瘤,发病率和死亡率不容乐观,其中
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目的:肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,死亡率在各类恶性肿瘤排名第一,2018年11月发表在CA杂志上的结果显示肺癌仍然是全球最常见的恶性肿瘤,发病率和死亡率不容乐观,其中肺癌在所发生的肿瘤中占11.6%,也是癌症死亡的主要原因,占癌症总死亡人数的18.4%,这些数据均表明肺癌具有高发病率和高死亡率的特征。其中非小细胞肺癌(NSCLC)占肺癌的75-85﹪。目前肺癌主要采取以手术为主,放化疗为辅的综合治疗,尽管在肿瘤学的研究中取得了重要成果,但复发和转移仍是导致患者治疗失败和死亡的主要原因,且NSCLC的5年生存率不超过15%,因此寻找有效的治疗靶点成为治疗肺癌的突破口之一。GTP结合蛋白(guanosine 5’-triphosphate-binding proteins,GTPBPs)是一类具有信号转导作用的蛋白,具有GTP水解酶活性。GTP结合蛋白在细胞信号传递、细胞骨架调节、蛋白质合成等活动中发挥重要作用。GTPBP2是G蛋白超家族的成员之一,其可与信号转导通路上的组成成分相互作用,继而可能参与肿瘤的发生发展。目前GTPBP2基因的表达与肿瘤的关系在国内外文献中还未见报道,在人类肺癌中的表达情况尚未研究。方法:本实验采用Western blot筛选高表达GTPBP2蛋白的细胞系。应用慢病毒载体介导的RNAi技术,沉默GTPBP2基因,并用Western blot和real timePCR检测沉默效果。细胞划痕实验、transwell实验和CCK8检测GTPBP2基因沉默后细胞迁移和增殖能力的变化。Western blot检测GTPBP2基因沉默后细胞迁移、侵袭和增殖相关蛋白的表达变化及Wnt/β-catenin信号通路上的相关蛋白,近一步验证GTPBP2对非小细胞肺癌细胞系的生物学功能。结果:GTPBP2蛋白在A549细胞系中表达量高于其他细胞系;沉默GTPBP2基因后的A549细胞迁移能力较阴性对照组下降;沉默GTPBP2基因后A549细胞的侵袭能力较阴性对照组明显下降;沉默GTPBP2基因后的A549细胞的增殖能力低于阴性对照组。结论:GTPBP2在A549中高表达,并与肿瘤细胞的迁移、侵袭及增殖功能相关。GTPBP2可能与肺非小细胞肺癌的发生、发展有关。
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