目的:肝癌在全球肿瘤相关死亡人数中位列第三,并且由于我国病毒性肝炎患者基数大和人口结构呈现老龄化,肝癌发病率仍然呈上升趋势。索拉非尼是手术无法切除的进展性肝癌一线治疗药物,但多数患者呈现索拉非尼原发耐药,初始有效者平均6个月后也会产生继发耐药,从而严重影响了索拉非尼在肝癌中的治疗效果。维甲酸相关孤儿受体（RORA）和雌激素相关受体（ESRRA）是维持机体代谢稳态的关键核受体。两者具有相似的空间分布和生理功能,但文献报道似乎在癌症进展中具有相反的作用。在本研究中,我们探讨RORA和ESRRA在肝癌中表达和相互间调节机制,及其在肝癌细胞索拉非尼耐药形成过程的相互作用。方法:根据两篇分别报道小鼠肝脏ESRRA和RORA调控靶基因的染色体免疫共沉淀（Chip）实验数据,通过在线通路数据库Reactome进行基因富集分析。通过JASPAR在线数据库检索,明确目的基因启动子序列与ESRRA、RORA结合的可能性。MERAV在线数据库分析ESRRA和RORA在人体正常肝脏和肝癌组织中的表达情况。Chip实验验证ESRRA、RORA在HepG2细胞内调控的靶基因。荧光素酶报告实验分析ESRRA、RORA彼此对对方下游基因的调控能力,ESRRA、HIF-1α对RORA不同变异体的表达调控及ESRRA和RORA不同变异体对PXR、G6PC和MDR1的表达调控。免疫共沉淀实验检测ESRRA与RORA变异体（RORAv1、RORAv4）的结合能力。质粒转染及RT-PCR检测ESRRA和RORA在正常肝脏细胞和肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721中差异表达,CoCl2、ESRRA及其拮抗剂对不同RORA变异体的表达调控,ESRRA及索拉非尼对不同RORA变异体和HIF-1α的表达调控,ESRRA及不同RORA变异体对细胞周期相关基因、代谢相关基因、异型物质转运相关基因和活性氧清除系统相关基因的表达调控。细胞活力实验和细胞凋亡实验分析不同干预措施下索拉非尼的细胞毒性反应。细胞增殖实验分析ESRRA和不同RORA变异体对细胞增殖能力的影响。DCFH-DA探针检测细胞内活性氧浓度。MDA法检测细胞内脂质氧化程度。SOD和GSH检测ESRRA和不同RORA变异体SOD和GSH活性的影响。结果:RORA和ESRRA各自调控的信号通路具有部分重叠,并且RORA启动子区域存在ESRRA反应元件序列,从而RORA转录表达受ESRRA直接调控,ESRRA对RORAv1、RORAv4都具有转录激活作用。RORA能直接与ESRRA反应元件结合,而ESRRA则作为RORA的共同调节因子与RORAv4结合,从而两者彼此能相互调控对方下游基因表达。RORA和ESRRA在肝癌组织和肝癌细胞中呈低表达,两者表达呈正相关性。索拉非尼治疗后下调HIF-1α和RORAv4表达,而对RORAv1则无明显影响。CoCl2模拟的缺氧环境和HIF-α则能诱导RORAv4高表达,并与ESRRA具有协同作用。ESRRA能诱导肝癌细胞产生索拉非尼耐药,RORAv4具有促进作用,而RORAv1则能逆转ESRRA诱导产生的索拉非尼耐药。转染ESRRA可促进HepG2细胞增殖及代谢重编程,并上调HIF-1α、RORAv4及抑制细胞内活性氧浓度和脂质氧化,从而诱导肝癌细胞产生索拉非尼耐药,在此过程中ESRRA和RORAv4形成正反馈调控机制。RORAv1、RORAv4对细胞增殖和代谢重编程无明显影响,而是通过对细胞内活性氧浓度、异型物质代谢通路的不同调控作用,而对ESRRA诱导产生的索拉非尼耐药产生截然相反的影响。结论:ESRRA能诱导肝癌细胞产生索拉非尼耐药,RORAv4促进ESRRA诱导产生的索拉非尼耐药,并且两者构成正反馈调控机制,而RORAv1则抑制ESRRA诱导产生的索拉非尼耐药。