邻苯二甲酸二乙基己酯(Di-(2-ethylhexyl) phthalate, DEHP)因其具有良好的可塑性和延展性,作为一种塑化剂常被广泛用于各种塑料制品的生产,这些塑料制品涉及到人类生活的各个方面,例如儿童玩具、化妆品、食品包装、医用输血管、塑料薄膜等。在塑料制品中,DEHP与PVC材料不能形成稳定的共价键连接,而是以氢键或范德华力结合,故在加热或与油脂等接触时容易进入到环境中,通过呼吸、皮肤接触或直接食入等方式进入人体。已有的研究结果表明,DEHP在体内具有雌激素样作用,可干扰内分泌系统功能,对肝脏、睾丸等器官产生损伤,进而影响生殖发育等。越来越多的研究证据显示,DEHP也可对神经细胞产生毒性作用,进而影响中枢神经系统的功能,但其机制有待进一步研究。研究发现DEHP可引起大脑的过氧化损伤,而过氧化损伤可导致学习与记忆功能障碍。我们推测DEHP可通过过氧化损伤引起学习与记忆能力障碍,因此,本实验以昆明小鼠作为研究对象,通过灌胃给予DEHP,以研究DEHP对小鼠学习与记忆能力的影响及其潜在的作用机制。分别每天给予小鼠DEHP处理,或给予不同浓度的抗氧化剂维生素E (Vitamin E, VitE)预处理后再给予DEHP等,以上药物连续处理3周后,利用Morris水迷宫、新异物体识别实验等行为学方法检测上述处理对小鼠学习与记忆能力的影响。通过用免疫印迹方法检测参与调控记忆形成及巩固过程中相关蛋白的含量及活性改变,如PKA、CREB、PSD-95、BDNF等以探讨DEHP导致学习与记忆损伤的可能机制。结果发现：(1)以250mg/kg/day剂量的DEHP连续灌胃3周,小鼠未产生急性的毒性反应,体重及活动量也无明显变化。但用高架十字迷宫方法检测发现,DEHP组进入开放臂的时间及次数显著低于对照组,显示出焦虑状态,而VitE预处理组可缓解小鼠的焦虑情绪变化。(2)Morris水迷宫实验中,DEHP组小鼠在定位航行阶段找到平台的潜伏期明显延长,空间探索阶段在平台所在象限的搜索时间和穿越平台所在象限的次数减少,VitE预处理组能改善上述变化,并具有VitE浓度相关性。(3)新异物体识别任务中,DEHP处理组小鼠对新物体的识别能力相比于对照组显著性降低,辨别指数差异显著,提示DEHP损伤了小鼠的记忆识别能力；VitE预处理组能显著增加小鼠探索新物体的时间,增强小鼠物体识别能力,并具有剂量相关性。(4)海马组织内活性氧族(ROS)及丙二醛(MDA)含量的检测结果表明：与对照组相比,DEHP组小鼠ROS荧光值和MDA含量显著性增加,不同浓度的VitE预处理能阻止ROS和MDA的含量升高。(5)免疫印迹结果显示,与对照组相比,DEHP处理组PKA的活性及其下游作用底物CREB的Ser133位点的磷酸化水平显著降低,同时DEHP处理会引起记忆相关蛋白PSD-9及BDNF的表达减少；而给予不同浓度的VitE预处理可阻止DEHP诱导的PKA及CREB的活性下调,增加PSD-95和BDNF的含量,结果有显著的统计学差异。以上结果表明：DEHP处理可能导致小鼠大脑的过氧化损伤,进而引起小鼠空间学习与记忆及新异物体的识别能力障碍,并有致焦虑作用。而VitE预处理可显著阻断小鼠上述行为学的改变。BDNF、PSD-95和PKA-CREB信号通路在DEHP诱导的认知障碍过程中发挥重要作用。本研究为DEHP诱导的中枢神经系统学习与记忆能力障碍的机制性研究提供了实验依据,为VitE的抗氧化作用在预防DEHP造成的认知障碍中的应用提供了参考。