Serpina-1在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义

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目的:甲状腺乳头状癌作为内分泌恶性肿瘤中的常见种类,其恶性程度略低于其它类型的内分泌癌症,但是其早期即可出现远处组织转移现象也提高了该种恶性肿瘤的危险程度。因此通过发现远处转移的征象并尽早进行处理可以降低其危险性。在过去的检查方式中,只有在外科手术将甲状腺结节组织切除后并送往病理科进行检验才能确定该结节的良恶性,此时可能会增大过度诊疗的风险;而现在,超声技术不断发展,超声引导下组织活检技术也在齐头并进,甲状腺结节可以通过超声引导下甲状腺细针穿刺活检技术进行细胞学以及基因学的诊断。本研究期望能够通过使用生信分析获得差异基因,从中挑选目的基因并验证其在癌组织以及癌旁正常组织中的表达量以及其对细胞生物学行为的影响,最终获得一个能够检验结节良恶性的分子指标。经过数据库资料的分析以及查阅文献,本研究最终将Serpina-1作为目的基因,并通过rt-PCR验证其在甲状腺乳头状癌组织和癌旁正常组织中的差异表达,同时研究Serpina-1基因在甲状腺乳头状癌的表达及其对甲状腺乳头状癌细胞生物学行为的影响。为探索诊断甲状腺结节良恶性的靶向分子提供一定的理论依据。方法:1.通过对比数据库中甲状腺乳头状癌的基因信息,使用生物信息学分析获得差异基因,同时检索相关资料,最终选取差异基因Serpina-1作为目的基因来进行研究和阐述;2.使用实时荧光定量(rt-PCR)检测Serpina-1在甲状腺乳头状组织和癌旁组织的表达量;3.构建Serpina-1的慢病毒载体后转染甲状腺乳头状癌细胞,实现Serpina-1基因在甲状腺乳头状癌里的沉默和过表达。而后通过PCR以及WB检测转染效果;4.对转染过的细胞进行包括流式细胞术、CCK-8、划痕实验、Transwell实验检测Serpina-1对甲状腺乳头状癌细胞的生物学行为的具体影响。结果:1.通过生物信息学分析本研究最终将Serpina-1作为目的基因进行研究;2.通过对6例临床收集的甲状腺乳头状癌组织以及癌旁组织进行RT-PCR检测Serpina-1的表达量,本研究发现在癌组织中Serpina-1的表达量高于癌旁组织中的表达量;3.构建了高表达Serpina-1的慢病毒载体,同时构建了干扰Serpina-1表达的慢病毒载体,而后转染至甲状腺乳头状癌细胞(B-CPAP细胞系)内;4.通过不同的实验发现,Serpina-1高表达组的细胞增殖活性、迁移能力以及侵袭能力高于空白对照组;干扰组的细胞增殖活性、迁移能力以及侵袭能力低于其空白对照组;结论:1.泛癌分析得出Serpina-1在膀胱移行细胞癌、胆管癌、多形性成胶质细胞瘤、头颈部鳞状细胞癌、肾嫌色细胞癌、肾透明细胞癌、肾乳头状细胞癌、肝脏肝细胞癌、肺腺癌、肺鳞癌、皮肤黑色素瘤、胃腺癌、子宫内膜癌等多种恶性肿瘤中高表达;2.Serpina-1在甲状腺乳头状癌和癌旁正常组织中呈现差异性表达,且在癌组织中表达量高于癌旁正常组织;3.Serpina-1的高表达可以增强甲状腺乳头状癌细胞的增殖活性;4.Serpina-1的高表达会增强甲状腺乳头状癌细胞的迁移运动能力;5.Serpina-1高表达可以增强甲状腺乳头状癌细胞的侵袭能力;6.Serpina-1的低表达可以调控甲状腺乳头状癌的细胞周期。因此,Serpina-1可能成为未来一个甲状腺乳头状癌研究的重要靶点。为高危型甲状腺乳头状癌患者的预警诊断靶点分子及靶向药物的研究及治疗提供了一定的理论证据支持。
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