研究目的 1．研究姜黄素抗三氧化二砷（As₂O₃）诱变性的作用及其剂量效应。 2．研究单用姜黄素及与As₂O₃合用抑制人肝癌细胞HepG₂、人胃癌细胞SGC7901生长并诱导人宫颈癌细胞HeLa凋亡的作用，及其对HeLa细胞生长周期的影响。 3．探讨姜黄素抗突变、抗肿瘤作用，为研制开发抗诱变药品和保健品以及临床上联用姜黄素与As₂O₃抗肿瘤治疗提供实验依据。 研究方法 1．姜黄素抗As₂O₃的诱变性研究 （1）小鼠骨髓细胞微核（MN）实验。各组分别用色拉油或各浓度姜黄素溶液连续灌胃7天后，腹腔注射生理盐水或As₂O₃溶液，处死前4h各组腹腔注射秋水仙素液。直接涂片法制片，染色后双盲法阅片，计数1000个嗜多染红细胞，并记录含有MN的嗜多染红细胞数，计算MN率。 （2）体外人外周血淋巴细胞MN实验。无菌操作培养人外周血淋巴细胞24h后，各组分别加入各浓度As₂O₃溶液及（或）姜黄素溶液。44h后加入秋水仙素液，继续培养4h，空气干燥法制片。染色后双盲法阅片，计数含有1000个淋巴细胞，并记录含有MN的淋巴细胞数，计算MN率。 2．姜黄素和As₂O₃联用诱导细胞凋亡的研究 （1）姜黄素与As₂O₃对SGC7901和HepG₂两种细胞株生长和凋亡的影响。取培养至对数生长期的SGC7901及HepG₂细胞分别接种于96孔培养板，培养24h后，各组加入无血清培养基或各浓度As₂O₃溶液及姜黄素溶液。加药24h后，在光镜下观察各组细胞的生长状态，采用MTT法检测各孔的光密度（OD）值，并计算生长抑制率。 （2）姜黄素与As₂O₃对HeLa细胞凋亡率及细胞周期的影响。取培养至对数生长期的HeLa细胞接种于24孔培养板，培养24h后，各组加入无血清培养基或各浓度As₂O₃溶液及姜黄素溶液；加药24h后，在光镜下观察各组细胞的生长状态，采用流式细胞仪（FCM）碘化丙啶（PI）单染法检测单用姜黄素及As₂O₃合用对HeLa细胞凋亡率及其细胞周期的影响，计算凋亡率。 研究结果 1．小鼠骨髓细胞MN实验 As₂O₃组小鼠骨髓细胞的MN率最大；As₂O₃+中浓度姜黄素组，小鼠骨髓细胞的MN率最低。与空白对照组比较，As₂O₃+中、低浓度姜黄素组有显著性差异（p＜0.05），As₂O₃组及As₂O₃+高浓度姜黄素组均有更显著性差异（p＜0.01）。 2．人外周血淋巴细胞MN实验