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目的 本实验将以巢蛋白(Nestin)作为神经干细胞的标志,应用大鼠全脑缺血模型检测海马区Nestin与碱性成纤维生长因子(bFGF)表达动态变化规律及其它们之间的关系。初步探讨内源性神经干细胞增殖、分化的机制。 材料和方法 健康成年Sprague-Dewley(SD)大鼠40只,每组4只,随机分成10组,分别是正常组及9个时段实验组。实验组采用Pulsinelli四血管闭塞法大鼠全脑缺血模型,全脑缺血30分钟,分别于再灌3小时,6小时,12小时,24小时,3天,7天,14天,21天,28天处死取材。标本制作成石腊切片,应用免疫组织化学染色的方法检测Nestin与bFGF在海马区的表达。 结果 (1) Nestin检测:正常对照组海马各区神经细胞未见Nestin染色阳性细胞,缺血再灌注3h室管膜下区(SVZ)等有阳性细胞表达,SVZ可见少量表达,再灌注6小时海马区可见少量表达,7天明显表达,14天达到高峰,再灌注第21天、28天仍有表达,但逐渐减少。各组的阳性细胞数用平均数±标准差表示,对照组与各实验组均数方差分析F=2.43,P<0.05,各均数间的差别有显著统计意义。各组与前组均数相比P<0.05差别有显著统计意义。 (2) bFGF检测:正常组大鼠脑海马区可见少量较弱的bFGF表达,再灌注3小时表达增加,6小时明显增加,再灌注7天达最高峰,14天、21天表达逐渐减少、28天仍有表达,减少至正常水平,各组的阳性细胞数用平均数±标准差表示,对照组与各实验组均数方差分析F=2.24,P<0.05,各均数间的差别有显著统计意义。3h组与对照组、6h组与3h、24h至21d相邻组之间相比P<0.05有明显差异,再灌注21天、28天恢复至正常水平,两组间、两组与对照组相比P>0.05,结果无明显差异。 结论 大鼠全脑缺血海马区Nestin、bFGF阳性细胞表达增加。Nestin、bFGF的表达具有一定的时间关联性,在一定时间段上bFGF可能具有促进Nestin表达的作用。