响应面优化高压均质提取黑木耳多糖及其降血脂功能研究

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:xw54073601
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高血脂症是动脉粥样硬化、心脑血管相关疾病的主要诱因之一,因此降血脂活性成分的开发成为近年来研究热点。黑木耳多糖作为生理活性物质,近年来日益受到人们的重视。本研究以黑木耳为研究对象,对其降血脂活性成分进行体外筛选,并通过体内用药进行降血脂活性分析,旨在分析其对高血脂症的降血脂效果,促进黑木耳及其多糖资源的深度开发利用。研究结果如下:1.采用响应面优化高压均质法提取黑木耳多糖工艺参数,根据优化结果确定提取参数为:均质时间24.91mmin,均质压力24.66MPa,料液比1:76.15,黑木耳多糖得率理论值可达40.74%。2.通过高压均质法以响应面优化参数为条件,0.1MHC1、蒸馏水、0.1MNaOH作为溶剂提取3种黑木耳多糖,将甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠作为评价指标,体外模拟胃肠道环境对其结合胆酸盐能力进行评价,结果显示碱提黑木耳多糖结合甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠效果最好,酸提黑木耳多糖次之,水提黑木耳多糖结合率最低;通过对碱提黑木耳多糖进行乙醇沉淀法分级,得到50%、60%、70%、80%、90%、100%醇沉的6段碱提黑木耳多糖,并进一步分析其体外结合胆酸盐能力,结果表明:70%醇沉的碱提黑木耳多糖(J-70)结合甘氨胆酸钠和牛磺胆酸钠能力均优于其他级分,因此选其作为动物实验原料。3.通过喂食高脂饲料同时灌胃J-70多糖溶液建立预防型小鼠高血脂模型,考察黑木耳多糖J-70预防高血脂作用效果。结果显示:J-70对于长期食用高脂饲料小鼠具有显著的降血脂作用。J-70能够减缓小鼠体重增长,降低肝脏指数和动脉粥样硬化指数,其中高剂量组作用效果极显著;血脂四项水平显示J-70能够升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C),降低胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的含量,其中中剂量组作用显著,高剂量组作用极显著,受试物各组小鼠低密度胆固醇(LDL-L)含量也有所降低,但作用效果不显著;脂代谢相关酶类测定结果表明J-70具有升高脂类代谢相关酶卵磷脂酰基转移酶(LCAT)含量,提高脂蛋白酯酶(LPL)和肝酯酶(HL)活性的作用,且中高剂量组作用极显著;在抗氧化方面,J-70和剂量组均能显著能够升高总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽还原酶(GSH-PX)的活性,具有一定抗氧化作用。4.通过喂食高脂饲料方法建立小鼠高血脂模型,模型建成后用J-70进行灌胃给药,对黑木耳多糖J-70对高脂模型小鼠的降血脂作用效果进行评价。实验结果表明:J-70对于控制小鼠体重增长均有显著效果,中高剂量组作用效果极显著,同时J-70能够抑制肝脏指数的上升,并提高高脂小鼠的脾指数,进而增强其免疫功能;动脉粥样硬化指数(AI)结果显示J-70各组均能够极显著降低高血脂小鼠的AI值,说明其在一定程度上能够阻碍高脂小鼠动脉粥样硬化的发生;血脂四项水平结果显示,J-70能够降低小鼠的TC、TG及LDL-C水平,中剂量组作用显著,高剂量组作用极显著,在升高HDL-C含量方面受试物各组均表现极显著,说明J-70能够控制高血脂症小鼠的血脂水平:脂类代谢相关酶类测定结果显示:J-70各组均能够极显著增加LCAT含量,显著提高LPL和HL的活性,并呈现一定的剂量依赖;在抗氧化方面,J-70能够极显著的升高T-SOD和GSH-Px的活性,有效的治疗高血脂症引起的脂质过氧化损伤。本研究通过响应面法对高压均质提取黑木耳多糖进行工艺优化,通过体外降血脂活性片段筛选得出最优组分为J-70(70%乙醇醇沉碱溶液高压均质优化参数下提取)分析其体外降血脂活性,并创新性的分别对其降血脂作用的预防和治疗效果进行分析,发现黑木耳多糖J-70具有潜在的降血脂功能。
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