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不同作物轮作是克服其连作障碍的重要措施,香蕉与菠萝轮作能有效缓解香蕉土传枯萎病,因此本研究采用田间调研和盆栽试验相结合的方式,利用Real-time PCR和Miseq高通量测序技术,对不同菠萝品种轮作及其残体缓解高发病香蕉土壤的生物障碍效果及机制进行了分析。主要研究结果如下:(1)盆栽试验表明在高发枯萎病的蕉园土壤中,种植“金菠萝”和“台农17号”(B_GP和B_PP)后,对土壤中可培养尖孢镰刀菌数量显著降低,同时增加了土壤有机质和速效磷含量。Real-time PCR表明,香蕉种植处理(B)根际的尖孢镰刀菌数量高于土体,而不同菠萝种植处理的根际尖孢镰刀菌数量均低于土体;与休耕(CK)和香蕉种植(B)处理相比,“台农17号”处理(B_PP)对土壤中尖孢镰刀菌数量显著降低。同时,Miseq高通量测序结果表明,“台农17号”种植处理的尖孢镰刀菌(Fusarium)的相对丰度显著低于其他处理,且不同菠萝种植后显著改变土壤细菌的Chao、ACE、Shannon及Invsimpson值和微生物群落结构,显著增加了土体细菌酸杆菌GP1、纤线杆菌属(Ktedonobacter)及真菌青霉菌(Penicillium)、被孢菌属(Mortierella)、踝节菌属(Talaromyces)和Purpureocillium菌的相对丰度;显著增加了根际细菌硝化细菌(Nitrolancea)、链霉菌属(Streptomyces)及真菌踝节菌属(Talaromyces)、青霉(Penicillium)和曲霉菌(Aspergillus)的相对丰度。(2)“金菠萝”和“台农17号”种植后,再植代香蕉幼苗枯萎病发病率显著降低,同休耕后再植香蕉(Z_CK)处理相比,防病率分别增加了79.17%和88.43%;同香蕉连作(Z_B)处理相比,防病率分别增加了83.80%和81.11%。“台农17号”种植后再植香蕉幼苗植株对土壤速效磷、速效钾、碱解氮养分含量吸收显著提高。不同菠萝种植后再植代香蕉的可培养尖孢镰刀菌、真菌数量显著低于香蕉连作处理,其中“台农17号”(Z_PP)轮作处理的Real-time PCR根际尖孢镰刀菌数量极显著低于其他处理。Miseq高通量测序结果同样表明,“台农17号”(Z_PP)轮作处理土壤中尖孢镰刀菌的相对丰度显著低于香蕉(Z_B)处理。同时,在种植菠萝后存在的优势酸杆菌Gp1、踝节菌属(Talaromyces)、青霉(Penicillium)和曲霉菌(Aspergillus),在“台农17号”种植后的再植代香蕉(Z_PP)处理土壤中也显著存在。此外,“台农17号”(Z_PP)轮作处理还显著增加了土壤中伯克氏菌属(Burkholderia)和假单胞菌(Pseudomonas)的相对丰度。(3)添加2%和3%菠萝残体后,下茬香蕉幼苗枯萎病发病率显著降低,其中添加3%“金菠萝”(C_GP)和“台农17号”(C_PP)效果更好,与无添加(C_CK)相比,防病率分别增加了55.17%和65.52%;与添加3%香蕉(C_B)残体相比,防病率分别增加了63.89%和72.22%。同时,Real-time PCR结果也表明,“台农17号”残体添加处理(C_PP)根际土壤中尖孢镰刀菌数量和相对丰度均显著低于其他处理。其中,添加3%“台农17号”残体处理显著增加了土体细菌中的芽单孢菌属(Gemmatimonas)、鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas)和真菌中的曲霉菌(Aspergillus)及青霉(Penicillium)的相对丰度;显著增加根际细菌的中假单胞菌(Pseudomonas)、芽孢杆菌(Bacillus)、Thauera菌、Elaphocordyceps菌和真菌中的曲霉菌(Aspergillus)及青霉(Penicillium)的相对丰度。(4)添加1%和10%不同菠萝品种的根茎叶和果实浸提液,均能显著抑制病原菌孢子萌发和菌丝生长,其中,添加10%时更为显著。添加10%时,香蕉叶和根浸提液对孢子萌发促进率分别为14.59%和21.88%,而巴厘的叶根果、金菠萝的叶根果、台农17号的叶根果对尖孢镰刀菌孢子萌发抑制率分别为49.41%、63.76%、92.94%、48.47%、90.59%、92.71%、28.47%、51.29%、100.00%,其中菠萝果实的抑制效果极其明显。综上所述,不同菠萝品种轮作及其残体对缓解香蕉连作障碍存在显著差异,其中,“金菠萝”和“台农17号”效果显著,“台农17号”菠萝最好。Real-time PCR及Miseq高通量测序表明,“台农17号”轮作及其残体添加到土壤中显著降低土壤中尖孢镰刀菌的数量,有效防控香蕉幼苗枯萎病的发生,且显著增加土壤细菌酸杆菌GP1、伯克氏菌属(Burkholderia)和假单胞菌(Pseudomonas),真菌属中的青霉菌(Penicillium)、踝节菌属(Talaromyces)和曲霉菌(Aspergillus)的相对丰度等。