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目的:
观察不同时期圆锥角膜患者角膜微观结构,拟发现活体和离体状态下圆锥角膜的特异性改变,试图了解圆锥角膜的进展过程及发病机制。
方法:
观察21例(32眼)圆锥角膜患者的角膜共焦显微镜图像,对照组17人(26眼),分别比较角膜病变区域角膜细胞的形态及密度、神经纤维的形态及数量、角膜各层组织形态学异常。并对已行穿透性角膜移植的6例离体圆锥角膜标本应用常规病理方法行制成石蜡切片及超薄切片,分别利用光镜及电镜观察离体状态下圆锥角膜各层次角膜细胞的超微结构的改变。
结果:
激光共焦显微镜观察到圆锥角膜随着病情的进展,后弹力层、后基质层甚至前基质可依次出现数量不等排列规则的裂隙样暗纹,部分可见角膜瘢痕呈不规则呈强反光的无细胞区域。晚期圆锥角膜各层次弯曲皱褶明显,结构紊乱。角膜基质细胞核拉长、排列出现紊乱。圆锥角膜上皮层、内皮层角膜细胞计数与正常对照组无明显差异(P>0.05),前基质层和后基质层细胞计数低于正常人(P<0.05)。圆锥角膜的神经纤维直径增粗,增多,相互交叉、分支处可见不规则形膨大突出等,单位面积内神经纤维密度明显高于正常对照组(P<0.01)。光镜下,圆锥角膜锥顶对应部位的上皮层变薄,基底膜局部断裂,可见上皮细胞及基质细胞长入,内皮细胞有扩大拉长的现象。在电镜下,可观察到圆锥角膜基质细胞核固缩,线粒体增多,内粗面内质网增加多,胞浆空泡样变。
结论:
圆锥角膜早期前基质层皱褶及后基质层暗纹可知早期圆锥角膜基质层的胶原纤维结构已发生改变。基质细胞粗面内质网增多,异染色质减少,说明这些基质细胞处于蛋白合成的旺盛阶段,支持圆锥角膜基质病因学说。