目的：观察附子急性毒性和长期毒性中心脏毒性反应表现和特点,研究附子心脏毒作用机制,为临床合理应用附子提供科学依据。方法：1.按照国际ICH规范,在GLP实验室条件下,进行黑顺片、白附片和泥附子醇提物灌胃小鼠的LD50测定,黑顺片、白附片和泥附子水提物灌胃小鼠的最大耐受量测定,以及6个提取物灌胃大鼠的急性毒性试验,观察附子急性毒性反应中的心脏毒性反应表现和特点；2.按照国际ICH规范,在GLP实验室条件下,进行泥附子醇提物灌胃正常大鼠3个月长期毒性试验,观察附子长期毒性中心脏毒性反应表现和特点；3.采用细胞培养技术观察附子中乌头碱不同浓度作用30min对乳鼠原代培养心肌细胞形态、超微结构、膜稳定性、内环境、能量代谢的影响,探讨附子心脏毒性的机制。结果：1.急性毒性试验结果：黑顺片醇提物灌胃小鼠的半数致死量(LD50)为5.783g/kg(相当于49.853g生药/kg),95%可信限为5.313～6.338g/kg(相当于45.804～54.636g生药/kg)；白附片醇提物灌胃小鼠的LDso为6.872g/kg(相当于42.550g生药/kg),95%可信限为6.173～7.724g/kg(相当于38.221～47.828g生药/kg)；泥附子醇提物灌胃小鼠的LD50为5.054g/kg(相当于22.168g生药/kg),95%可信限为4.798～5.361g/kg(相当于21.043～23.513g生药/kg)；黑顺片、白附片、泥附子水提物灌胃小鼠的最大给药量(MTD)分别为21.273、25.597、60.932g/kg,分别相当于48.80、59.00、92.80g生药/kg。黑顺片醇提物5.08g/kg、白附片醇提物6.06g/kg、泥附子醇提物4.56g/kg灌胃大鼠可引起动物死亡和明显的毒性反应,黑顺片水提物以21.27g/kg、白附片水提物25.60g/kg、泥附子水提物30.48g/kg灌胃大鼠不引起明显急性毒性反应。附子醇提物灌胃大鼠、小鼠的急性毒性反应以心脏毒性、神经毒性和消化系统毒性为主,其中心脏毒性反应特点为,先出现心率加快和心律不齐,体热,皮肤、尾、足垫发红,心前区搏动明显加快,逐渐转为体凉,唇爪、尾部、耳、足垫苍白,唇爪发绀,最后心前区搏动减弱,心率减慢,死亡。血液中CK可出现异常,心肌充血致心脏系数增大。2.长期毒性试验结果：泥附子醇提物6.20g生药/kg灌胃大鼠3个月,不引起明显毒性反应,但早期给药时在给药后心前区搏动有所加快,心律紊乱,雄鼠耗食量降低,随后恢复正常；实验结束时血液学中MID升高,病理组织学检查显示有心脏损伤,主要表现心肌小片状或灶性坏死、溶解,伴随慢性炎细胞浸润及纤维结缔组织增生。部分动物肾脏有肾小管上皮细胞浊肿、轻度空泡性变及少量透明管型。3.附子中乌头碱心脏毒作用机制研究结果：乌头碱对原代培养SD乳鼠心肌细胞作用30min的最小毒性浓度为O.2%,在0.2%、0.36%、0.63%、1.13%、2%范围内作用30mmin,可引起细胞搏动减弱、消失,细胞变形、体积变小、脱壁、固缩和死亡；电子显微镜观察可见胞浆内空洞形成,线粒体肿胀和粗面内质网扩张,随着浓度的增加线粒体肿胀数量和程度增加,出现嵴断裂和线粒体破裂,细胞核形态异常和染色质边迹,细胞膜不完整,至最高浓度时可见大量细胞碎片,核固缩,胞浆内大量空洞,无正常线粒体和内质网,细胞形态消失。乌头碱可使细胞漏出LDH增加,细胞内ACP活性升高,糖原含量降低,MDA含量升高,细胞内K+减少而Ca2+增加,Ca2+-ATP酶活力降低。结论：1.附子急性心脏毒性反应表现特点为：先出现心率加快和心律不齐,皮肤、尾、足垫发红,体热,心前区搏动明显加快,逐渐转为体凉,唇爪、尾部、耳、足垫苍白,唇爪发绀,最后心前区搏动减弱,心率减慢,死亡。2.附子慢性心脏毒性反应表现特点为：早期给药引起心率加快、心律不齐,但能在短时间内恢复,且随着给药时间的延长心脏毒性反应发生率下降,可引起慢性心脏损伤,病变以灶性坏死和溶解、纤维组织增生为主。3.乌头碱是附子心脏毒性的重要物质基础,附子的心脏毒作用机制是通过破坏心肌细胞形态和超微结构,使细胞膜稳定性受损,细胞能量代谢异常,内环境紊乱,细胞增殖异常等达到,毒性强度随给药剂量增加和作用时间延长而增强,在一定范围内呈显著毒-量正相关性和时-毒正相关性。