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目的:本研究通过临床疗效观察,评价LASEK与PRK手术治疗不同程度近视的有效性、安全性与稳定性,用以指导临床上屈光手术的术式选择。通过观察两种手术后动物角膜组织形态的改变及角膜创面愈合情况,为探讨LASEK与PRK手术后角膜创面的愈合机制以及术后常见并发症的发生原因及其防治提供实验依据。方法:本研究分为临床观察部分和组织病理学实验研究部分。1)临床研究:将70名不同程度的近视患者分为中低度近视组和高度近视组,进行了同一病例左、右眼不同术式即LASEK与PRK的矫正。通过临床疗效观察和活体角膜激光共聚焦显微镜观察比较术后上皮恢复时间、术眼疼痛程度、术后3、6个月的裸眼视力与残留屈光度及角膜haze形成情况。2)实验研究:将52只新西兰白兔分为8组,即正常对照组3只与术后1天、7天、1月、3月、4月、5月、6月组各7只,对同一只兔的左右眼实施不同术式,运用HE染色、免疫组化、Western Blot检测、透射电镜和扫描电镜等方法比较术后每一时相点角膜上皮愈合情况、角膜基质内Ⅰ型、Ⅲ型、Ⅴ型、Ⅵ型胶原蛋白的形态与含量的动态变化过程。结果:1)临床部分:①LASEK与PRK术后角膜上皮修复时间及术眼疼痛程度无显著差异;②LASEK与PRK手术对中低度近视组矫正,术后3、6个月的裸眼视力和术后残留屈光度均无显著差异。高度近视组LASEK术后3、6个月的裸眼视力及术后3、6个月的残留屈光度均显著优于PRK;③LASEK与PRK术后6个月时haze的形态及形成指数均有显著差异;④活体激光共聚焦显微镜显示LASEK与PRK术后角膜上皮、基质的愈合情况不同。2)实验研究部分:①LASEK组与PRK组的术后组织形态学比较发现:术后LASEK组角膜上皮细胞的形态改变、胶原纤维排列的紊乱情况及角膜增厚的程度均轻于PRK组;②经免疫组化研究及Western Blot法测量发现LASEK组术后角膜基质中Ⅰ、Ⅲ型胶原开始增生的时间早于PRK组,表达的强度与PRK组有显著差异;两组的Ⅴ、Ⅵ型胶原动态变化曲线相似,达到表达高峰的时间一致,PRK组Ⅴ、Ⅵ型胶原的表达均明显高于LASEK组,术后6个月时LASEK组表达显著弱于PRK组。四种胶原的变化可能是PRK术后haze的形成比LASEK术后严重及屈光回退明显的原因之一。结论:<WP=8>(一) 临床部分1. 本研究采用同一病例双眼不同术式进行近视矫正的临床疗效对比,可明显减少病人症状描述以及创伤愈合修复的个体差异对疗效判定的影响,同时临床对比观察直观、真实,临床结果较为客观、准确。2. LASEK、PRK手术矫正中低度近视,具有相同的临床效果,两组术后裸眼视力、残留屈光度以及haze程度均无显著差异。证明两种术式对中低度近视的矫正均有较好的准确性和稳定性。3. LASEK对高度近视的疗效经6个月随访观察,其裸眼视力、屈光稳定性和haze形成情况显著好于PRK手术,说明LASEK对高度近视有更好的疗效和稳定性。4. LASEK术后角膜刺激症状程度及角膜上皮修复时间与PRK术后无明显差异,但修复方式有所不同。表明LASEK角膜上皮瓣对角膜上皮的修复方式及角膜基质的愈合有一定的影响。5. LASEK手术可扩大PRK的手术适应症,减少LASIK角膜瓣的风险,是准分子激光近视矫正手术适应症的很好补充。6. 对准分子激光角膜屈光手术,活体激光共聚焦显微镜观察是了解角膜创伤修复过程的理想手段。(二) 实验研究部分1. LASEK术后角膜上皮细胞的形态变化、增厚程度及恢复正常的时间与PRK组有明显差异,证明上皮瓣在角膜创面的愈合中有重要作用。2. PRK手术后角膜基质中Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅵ型胶原的表达强度、达到高峰及恢复正常的时间与LASEK相比存在显著差异,表明PRK术后基质内有胶原的过量沉积,是临床PRK术后haze严重及屈光回退的组织学基础。3. LASEK术后角膜上皮细胞、基底膜、基质内胶原纤维和成纤维细胞的超微结构改变程度轻于PRK组,表明LASEK术后创伤修复反应弱于PRK,与临床观察结果一致。