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巴马香猪（Bama Minature pigs）具有体型矮小,生长缓慢、生精周期短、产仔量较大等特点,在解剖学、生理学及遗传学等方面与人类相似,现已成为非啮齿类大型动物实验模型、人类疾病研究模型的物种,具有良好的生物医学应用前景。胰岛素样生长因子1（IGF-1）是影响动物生长和体型性状的重要候选基因之一,在调控猪矮小性状形成过程中发挥重要作用,因此研究调控IGF-1表达的相关因素的分子机制具有重要意义。本研究首先筛查了巴马香猪及作为对照的大白猪IGF-1基因3’UTR的SNP位点,并分析了其可能存在的功能。结果发现,两猪种之间存在一处SNP位点（rs34142920,c.674C>T）,其中T为大白猪优势等位基因,C为巴马香猪优势等位基因。通过在线软件对不同基因型IGF-1基因3’UTR序列进行mRNA二级结构预测,结果发现两者之间mRNA二级结构及最小自由能均存在差异。为了观察不同基因型3’UTR的基因表达是否存在差异,构建了两种携带IGF-1基因3’UTR（C/T）的双荧光素酶报告基因重组质粒,命名为psi CHECK-3’UTR-B与psiCHECK-3’UTR-L,并将其转染至PK-15细胞中,48h后检测荧光素酶活性。结果表明,与psi CHECK-3’UTR-L组相比,psi CHECK-3’UTR-B组的荧光素酶活性降低了27.86%（p<0.05）。为了进一步探究该SNP影响IGF-1表达量的分子机制,通过文献得知猪中存在的miR-new14的种子序列与IGF-1基因3’UTR互补配对,且该SNP位于miR-new14与IGF-1基因3’UTR结合区域。因此,为了验证miR-new14是否因与不同基因型IGF-1基因3’UTR结合差异影响基因表达,本实验将miR-new14/miR-new14 NC与psi CHECK-3’UTR-B/psiCHECK-3’UTR-L双荧光素酶重组质粒共转染至PK-15细胞中,结果显示与miR-new14 NC共转染组相比,miR-new14各共转染组的荧光素酶活性均受到抑制（p<0.05）,且psiCHECK-3’UTR-B共转染组的荧光素酶活性受抑制程度显著高于psi CHECK-3’UTR-L共转染组（p<0.05）,表明miR-new14对不同3’UTR基因型的IGF-1的表达影响存在差异。为了进一步观察miR-new14是否能够调控内源性IGF-1基因的表达,本实验将miR-new14单独转染PK-15细胞,通过RT-qPCR和Western-Blot分别检测内源IGF-1 mRNA与蛋白质表达量,发现与对照组相比,miR-new14组的IGF-1 mRNA与蛋白质表达量均显著降低（p<0.05）,表明miR-new14抑制IGF-1转录和翻译水平。为了进一步明确mi R-new14调控IGF-1表达进而对细胞增殖与凋亡的影响及其机制,本研究将miR-new14转染PK-15细胞,通过CCK-8和流式细胞术分别检测细胞增殖和凋亡,并检测了与IGF-1相关的信号通路IGF-1/PI3K/Akt和IGF-1/MAPK/ERK中的关键因子AKT与ERK表达量。结果显示,转染后48-72h,miR-new14组的OD450值与miR-new14 NC组相比显著降低（p<0.05）,且凋亡结果显示转染miR-new14的细胞凋亡率（18.62±2.0%）显著高于miR-new14 NC组（13.35±1.61%）（p<0.05）,表明过表达的miR-new14抑制PK-15细胞的增殖,促进细胞凋亡。miR-new14组AKT与ERK m RNA表达水平显著低于miR-new14NC组（p<0.05）,miR-new14组与miR-new14 NC组中的AKT和ERK总蛋白质含量无明显差异,但miR-new14组中AKT与ERK蛋白质磷酸化水平显著低于miR-new14 NC组（p<0.05）,表明过表达miR-new14下调AKT和ERK转录水平,同时抑制AKT和ERK蛋白质磷酸化水平。综上所述,巴马香猪与大白猪IGF-1基因3’UTR存在的SNP能够引起IGF-1基因表达差异,miR-new14调控IGF-1 mRNA与蛋白质水平,并对携带不同基因型的3’UTR的IGF-1沉默效率不同。miRNA-new14抑制PK-15细胞增殖促进其凋亡,其机制可能是miR-new14下调IGF-1表达量,并引起AKT和ERK mRNA水平下降,同时抑制AKT和ERK蛋白质的磷酸化水平。