狍茸顶端组织转录组分析及功能基因克隆检测

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 4次 | 上传用户:li5815736
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
狍(Capreolus pygargus)是我国重要的经济动物,具有广泛的市场应用前景。本研究通过Illumina/Solexa测序平台进行狍茸顶端组织转录组测序,使用自体组装软件Trinity对测序短序列reads进行从头组装,建立狍茸顶端组织转录组数据库。并与蛋白数据库Nr、Swiss-Prot、KEGG和COG进行序列比对、功能注释及代谢通路分析;与已有的梅花鹿鹿茸顶端组织转录组数据库进行简单比较分析;在此基础上,我们选出癌症通路中ANXA-2和PTN功能基因进行克隆测序,获得了包含这两个基因全部编码区的cDNA序列,并与转录组测序数据库中拼接组装得到的这两个Unigene的cDNA序列进行比对,以佐证转录组测序数据库的准确性。从转录组水平开展对狍茸的研究,更有利于揭示狍茸的生长机制,为提高狍茸产量和质量提供理论依据。1、狍茸顶端组织转录组测序共得到的5千多万个高质量短序列reads,采用组装拼接后共获得两端不能再延长的Unigenes 36865个,平均长度932nt,N50值为1579nt,接近98%的序列测序质量值均在Q20(碱基测序错误率为1%)2、在数据库比对及功能基因的注释过程中,发现与Nr数据库比对上的Unigenes共22983条,可以直接确定其CDS区及序列方向。其余序列用ESTscan软件进行编码区预测,结果表明有510条可能为新的蛋白编码序列;在COG功能分类,共有8668条Unigenes被归类到25个功能类别中;通过GO功能分类,共有18273条Unigenes被归类到61个功能类别中:通过KEGG代谢通路分析,共有1 7284条基因注释到258个信号通路中。3、对狍茸转录组数据进行整体筛选分析,按照FPKM值从高到低的顺序排序发现,表达量较高的一类蛋白是胶原蛋白,在胶原蛋白中表达量最高的是COL1A1、 COL1A2, COL16A1、COL9A1、COL27A1。并且发现至少141种与生长相关的基因及受体,生长相关高表达基因中高表达的有TGFB3、IGF、TGFBP、IGF4、CTGFP、 PDGFR等;挑选出至少259种转录因子,这一类与转求相关高表达的基因中,表达量最高的为ATF4、TFAP1、GTFIIF、SNAI2、JunB、TFp65等;挑选出至少384种细胞外基质,大部分的细胞外基质主要集中在胶原类成分。4、克隆包含ANXA-2与PTN基因全部编码区的cDNA序列,分别编码339和168个氨基酸。与转录组数据库所测得序列进行比对,相似性分别为99.7%和99.0%,进一步佐证了本转录组测序结果的准确性。
其他文献
重载铁路具有低成本、高效率、运量大及污染少等优点,一直是我国乃至全世界努力发展的目标。随着重载铁路列车的不断提速以及轴重的增大,不仅会使承受列车荷载的轨道结构和轨下桥梁结构振动响应加剧,更易产生疲劳损伤和变形,也会使车-轨-桥系统中的相互作用加剧,使列车在桥上运行过程中安全性有所降低,进而导致脱轨事故。因此,系统地分析车辆、轨道、桥梁动力响应是十分必要的。本文首先阐述了当前国内外重载铁路的发展现状
随着社会的进步,工业的发展,智能交通系统、户外监控系统、卫星遥感系统、农产品质量检测系统等以图像为信息载体进行作业的工作系统已逐渐走进人们的生活。为了满足这些系统
近年来,鞍山城市发展和园林建设取得积极成效,城市道路景观提升显著提升。乔木、灌木、地被等植物材料是景观设计的基础,研究道路绿化植物的选择与配置具有重要意义。本文以
目的:分析现代临床上运用"治未病"思想治疗原发性痛经的现状,研究其用药规律并进行总体评价。方法:以《内经》及《伤寒杂病论》为例分析古籍对该原则的记载,检索2004~2014年
盖挖逆作法作为先进工法之一,与传统的明挖顺作相比具有减少周边土体沉降,保证周边建筑及地下管线安全,缩短场地占用时间,减小噪声和振动影响等优点。但是基坑盖挖逆作施工过
为探索过渡金属催化剂粒度对低燃温双基推进剂燃烧性能、点火性能的影响,分别测试了含不同粒度(1μm、3μm、5μm)过渡金属催化剂及粒度级配的低燃温双基推进剂的燃速。以压
在2017年教育部颁发的《关于全面深化课程改革,落实立德树人根本任务的意见》中,各个学科都明确提出了具有学科特点的核心素养.《普通高中数学课程标准》(2017年版)明确了六
由J.J.Arps提出的三种递减类型,即指数递减、双曲线递减和调和递减,在油、气藏工程中得到了极为广泛的应用。它们不但可以用于预测油、气藏的未来产量变化,而且可以预测达到
党的十八大以来,加强共产党员党性修养并提升党员政治能力得到了很大关注。越来越多的人意识到,只有加强党性修养,政治能力提升才能成为一种必然。党性修养的提升与政治能力
“为天地立心,为生民立命,为往圣继绝学,为万世开太平”是为北宋哲学家张载的名言,当代哲学家冯友兰将其称作“横渠四句”。“横渠四句”体现了张载的学术旨趣和人生理想,与