【摘 要】
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阳离子脂质体和核酸复合物组成的非病毒基因药物传输系统应用于临床和实验室领域。跟大多数脂质体不同,病毒载体在细胞中有很高的转染效率。为了克服病毒载体在临床基因治疗
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阳离子脂质体和核酸复合物组成的非病毒基因药物传输系统应用于临床和实验室领域。跟大多数脂质体不同,病毒载体在细胞中有很高的转染效率。为了克服病毒载体在临床基因治疗中的缺陷,非病毒载体作为替代物,在将DNA传输进活体动物方面具有很大潜能。尽管科研工作者已经发现了很多用于基因传输的脂质体,但是它们的转染效率和药物代谢动力学仍有待改进。为了增大载药量,减少毒副作用,我们选中多聚甘油酯作为底物合成阳离子脂质体。二十聚甘油单硬脂酸酯是一种食品添加剂,广泛用于制作冰淇淋、糖果、饮料和乳制品。在本研究中,二十聚甘油单硬脂酸酯上的羟基被羰基二咪唑催化,用梯度含氮量的二甲基乙胺修饰,该系列脂质体被命名为CDGMS。我们通过研究这种通过氨基修饰的特殊脂质体与DNA复合物的理化性质以便于理解脂质体结构与功能之间的联系。通过检测发现,该脂质体与Lipofectamine 2000相比具有较小的粒径和适当的表面电位。并且在凝胶阻滞实验中CDGMS-DNA复合物与Lipofectamine 2000相比只有较少部分的DNA作为游离的核酸被电离出孔。而在血清释放试验中,CDGMS-DNA复合物表现得更加稳定。CDGMS能包封大量的DNA,在等摩尔比条件下,包封量是Lipofectamine 2000的1.67~2.42倍。从收集的实验数据看出,CDGMS脂质体的细胞毒性明显比Lipofectamine 2000低,并且该系列脂质体能用于活体动物而不致死。而在3T3细胞的质粒转染试验中,CDGMS脂质体的转染效率与Lipofectamine 2000相当。为了阐明CDGMS脂质体具有较高质粒转染效率的机理,我们用细胞免疫实验证实了该脂质体具有在溶酶体逃逸的能力。
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