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油茶(Camellia oleifera Abel),茶科山茶属多年生木本油料植物,是我国特有的木本油料树种,主要用于加工茶油。据分析,油茶籽中蛋白质的含量约在6～8％,但是加工精制茶油后的油茶饼粕,其蛋白质含量可高达15～20％,且其氨基酸组成为17种,其中7种是人体必需氨基酸,具有很高的经济价值。
本研究以湖南衡阳的油茶籽以及湖南永州的油茶饼为原材料,先通过有机溶剂法(95％乙醇)提取出油茶籽(饼)蛋白,然后采用酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶以及复合酶分别对其进行水解,以水解液中活性肽的含量为目标,得出油茶籽(饼)蛋白最佳水解工具酶为碱性蛋白酶。
以碱性蛋白酶作为水解油茶籽(饼)蛋白的工具酶,水解温度、水解时间、水解pH和酶用量四个因素作为参试因子,采用四元二次通用旋转组合设计试验对油茶籽(饼)蛋白的水解工艺进行优化,得到油茶籽蛋白的最佳水解工艺组合为:温度53.77℃,pH9.03,时间4.84 h,酶用量100 mg/g(w/w),在此条件下,油茶籽蛋白水解液中活性肽的得率为42.85％；油茶饼蛋白的最佳水解工艺组合为:温度51.52℃,pH8.62,时间4.48 h,酶用量65.68 mg/g,在此条件下,油茶饼蛋白水解液中活性肽的得率为38.58％。
以小白鼠为试验对象,以小白鼠体内血清SOD及MDA浓度为测定指标,研究油茶籽(饼)蛋白水解液在小白鼠体内的抗氧化作用,油茶籽蛋白中剂量组和油茶饼蛋白高剂量组提高血清SOD值的效果为最显著(p＜0.001),对SOD活力的增加率分别为65.12％、43.02％；并且油茶籽蛋白中剂量组和油茶饼蛋白高剂量组降低血清MDA值的效果也是最好(p＜0.05)。所有试验结果表明油茶籽(饼)蛋白水解后得到的水解液具有明显的体内抗氧化作用,这也与体外羟自由基清除试验的结果相一致。
以大白鼠的体重增重、血清总胆固醇(TC)浓度、血清甘油三酯(TG)浓度、血清高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)浓度以及动脉硬化指数(AI)为评价指标,评价油茶籽(饼)蛋白水解液对大白鼠的血脂调节作用。结果显示:油茶籽(饼)蛋白水解液均能够极显著降低大白鼠的血清TC、TG浓度以及AI(p＜0.001),并且还可以显著提高其血清HDL-C浓度(p＜0.05)。这说明油茶籽(饼)蛋白水解液能够通过降低血清TC及TG浓度而降低由冠心病引起的死亡率及高血脂症患者的发病率。
油茶籽(饼)蛋白经碱性蛋白酶水解后得到的活性肽因为能够清除体内多余的自由基而具有明显的抗氧化作用,同时还具有较好的降血脂效果,因此具有延缓衰老、降低高血脂症患者发病率的功效。