优良双歧杆菌的筛选及其生理功能研究

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双歧杆菌作为人和动物肠道益生菌群的重要组成部分,具有促进体内营养物质的消化吸收、生物拮抗作用、提高免疫力和抗癌等生理功能。本课题从健康新生儿、婴儿及成人粪便中有目的性、针对性地筛选到一株耐酸、耐胆盐的双歧杆菌,并对其益生功能进行了研究。主要研究成果如下:(1)双歧杆菌的筛选和鉴定。利用添加X-Gal的改良MRS作为选择性培养基初筛得到75株疑似双歧杆菌的菌株,经耐酸耐胆盐复筛、生理生化鉴定及分子生物学鉴定后,确定一株优良菌株NCU712为长双歧杆菌。(2) NCU712的生长曲线。NCU712代谢葡萄糖产生乳酸、乙酸等有机酸,0-4h为延滞期,4-16h为对数生长期,16-24h为稳定期,24h之后,菌体进入衰亡期。(3) NCU712的胃肠道耐受性研究。在胃液pH2.5和3.0时,NCU712的D值分别为30.42、92.97min;菌体在胃液pH3.5和4.0的环境中,活菌数在培养过程中略有上升。人工肠液作用4.0h后,活菌数仍有108CFU/mL,且在0.30%胆盐环境中培养24h后,活菌数仅下降一个数量级。(4) NCU712的黏附性能研究。稳定期黏附性能最好,当菌体浓度<108CFU/mL时,NCU712的黏附指数随菌体浓度升高而增大,随后黏附指数变化不显著;共培养时间对菌体黏附性能影响在作用2.0h之后达到饱和;NCU712在中性环境的黏附性能最好。(5) NCU712的抗氧化性能研究。增大样品加入量,活菌体、菌体破碎物、CFS的DPPH、羟自由基清除率、总还原力、抗脂质过氧化率等抗氧化性能指标均升高,且CFS的DPPH清除率远高于阳性对照Vit C的清除率,最高可达100%,羟自由基清除率活菌体最高,CFS次之。(6) NCU712的抑菌性能研究。NCU712对7株常见致病菌有较好的抑菌效果,且发酵液抑菌性普遍比无菌上清液好。抑菌圈直径大小随发酵时间延长而增大,当发酵时间大于28h时,抑菌圈直径变化不显著。NCU712的代谢产物可延长沙门氏菌的延滞期,缩短对数期,当添加量大于12%时,沙门氏菌的生长被完全抑制,说明NCU712对沙门氏菌的生长有较好的抑制作用。
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