利用再生医学中的肝脏脱细胞基质介导建立兔肝癌脱细胞模型

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研究背景原发性肝癌是我国比较常见的恶性肿瘤,发病率高[1]。肝癌具有容易复发、肝内转移的生物学特性。多数患者在确诊时已丧失手术切除的机会。尽管目前中晚肝癌的主要治疗手段已达成共识为反复多次的TACE术。但术中很多量化指标大多数仍凭临床经验及回顾性研究所得,缺乏基础研究依据。此外,口前研究TACE术中的载药微球栓塞后的空间分布情况,基本局限于仿生血管模型,无法复制血管系统的几何特征。通过利用脱细胞法制备完整的脱细胞肝基质(DLM)是再生组织工程领域一项前沿技术。DLM是一种临时的物理支持,与功能性细胞相结合可制备组织/器官构建物。脱细胞化肝基质在微观和纳米结构水平上具有整个器官设计的自然结构,可支持体内外的细胞生长。目前,兔肝脱细胞模型在再生医学领域应用已相对成熟,兔VX2肝癌模型在介入研究实验的应用也逐渐普及,两者结合的兔VX2肝癌脱细胞模型概念却仍处于探索阶段。对于介入医师而言,兔VX2肝癌脱细胞模型可为介入基础研究提供另一个新平台、新途径。研究目的1.探究兔肝VX2肿瘤在影像学下的表现及兔肝癌模型的最佳建模时间?2.评估兔肝中的VX2肿瘤能否实现完全脱细胞化?3.明确兔肝是否适合用于制备介入脱细胞模型,脱细胞后的脉管系统可否行DSA造影,可超选的终点靶血管直径大小?材料与方法从南方医科大学实验动物中心购买2—2.5 kg的新西兰大白兔。通过后肢瘤株传代、兔肝种瘤及解剖取肝,分别制备正常兔肝及兔肝癌脱细胞模型。同时在脱细胞前对兔肝VX2肿瘤行超声及磁共振检查。对兔肝单肝叶及兔VX2肿瘤全肝依次进行脱细胞化,在脱细胞洗涤的过程中不断对肝实质及肿瘤脱细胞程度进行评估。验证模型可否能行DSA造影,测量评估模型可超选的终点靶血管直径大小。结果兔肝VX2肿瘤生长至10天时,超声及磁共振提示肿瘤周边血供丰富,中央因乏血供出现少许坏死。在种瘤后第2周是尽管肿瘤中央因乏血供会出现少许坏死,但瘤体体积适中。单肝叶及全肝实现完全脱细胞化的总时长分别为16小时及48小时。VX2肿瘤经过48小时洗涤,仍无法实现完全脱细胞化。兔肝脱细胞模型脉管网络系统完整,为肉眼可视化模型,可行DSA造影术。DSA下兔肝脱细胞模型造影显示可超选的终点靶血管为3级分支,即肝叶内静脉分支主干。结论通过超声及磁共振可明确活体兔肝VX2肿瘤的生长情况,种瘤后第2周为建立瘤模的最佳时间。全肝实现完全脱细胞化的总时长是48小时,为单肝叶脱细胞化的三倍;在维持全肝细胞外基质刚性的前提下,想实现VX2肿瘤完全脱细胞化仍需进一步探讨研究,目前无法有效协调解决该问题。微导管在兔肝脱细胞模型内可超选的终点靶血管为肝叶内静脉分支主干。兔VX2肝癌脱细胞模型在介入领域的应用具有指导意义。
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